专题汇总｜核酸、蛋白提取和检测

实验老司机 · 公众号 · · 2025-03-16 07:00

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图源：https://www.bioprocessintl.com/therapeutic-modalities/dna-synthesis-chemical-enzymatic-or-both-

核酸与蛋白的提取纯化及检测定量是分子生物学研究的基础实验技术。

核酸提取通过机械或化学方法（如超声破碎、SDS裂解）破坏细胞结构，结合蛋白酶K降解、酚/氯仿抽提或磁珠吸附等策略去除蛋白质、脂类等杂质，最终利用高盐吸附-低盐洗脱或醇沉淀获得高纯度核酸（如DNA/RNA）。

蛋白提取则依赖细胞裂解缓冲液（含还原剂）溶解目标蛋白，并通过离心、盐析或层析技术（如亲和层析、离子交换）分离纯化，其中His-tag标签蛋白常结合镍离子柱实现高效富集。

检测与定量方面，核酸可通过紫外分光光度法（A260/A280比值评估纯度及浓度）、荧光染料（如SYBR Green用于qPCR定量）或微阵列技术实现。

蛋白则常用SDS-PAGE电泳分离后银染或Western Blot特异性检测，或通过比色法（Bradford/Lowry）及高灵敏质谱法（LC-MS/MS）进行定量分析。

我们在过往曾发布过不少关于核酸、蛋白提取和检测的实验文章，下面是我们对这个主题的文章进行整理后的链接汇总（点击即可跳转至对应文章）：

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