乙型肝炎病毒(
HBV
)感染是全世界的主要健康问题。最近的证据表明,某些病毒可以通过包装具体的病毒,成体细胞成分和
由不同细胞分泌的小尺寸纳米(
30 - 150 nm
)小泡
操纵感染过程。然而,
HBV
复制产生的外来细胞含量的影响还没有完全划定。在这项研究中,一个病毒诱导细胞株
HepAD38
进行直接比较的
exosomes
蛋白含量分泌有或无
HBV
复制
HepAD38
细胞变化。外泌体从
HepAD38
细胞培养或无强力霉素(
Dox
)和上清液分离纯度确认由透射电子显微镜(
TEM
)和
Western
免疫印迹检测。离子强度为基础的无标记的
LC-MS/MS
定量技术应用于
HBV
复制
HepAD38
细胞
[
简称分析
exosomes
蛋白含量(
DOX
)
-
外
]
和
[
简称细胞
HBV
非复制
HepAD38
(
DOX
)
-
外
]
。共有
1412
的外来体蛋白组分进行了鉴定,其中
35
种蛋白质的丰度显著改变
HBV
复制。引人注目的是,
5
亚基蛋白
26S
蛋白酶体复合物,包括
psmc1
,两,
psmd1
,
psmd7
和
psmd14
在
HepAD38
始终加强(
DOX
)
-
外。微分
exosomal
蛋白质的生物信息学分析证实参与蛋白酶体降解过程成分显著富集。蛋白酶体活性实验进一步表明
HepAD38
(
DOX
)
- EXO
有增强的蛋白水解活性与
HepAD38
(
DOX
)
-
外。此外,人外周血单个核细胞孵育
HepAD38
(
DOX
)
-
外诱导水平显著降低
IL-6
的分泌以
HepAD38 IL-6
水平比较(
DOX
)
-
外。在外来的蛋白酶体活性不可逆抑制
IL-6
的细胞恢复较高的生产,这表明以
HepAD38
蛋白酶体亚基蛋白传输(
DOX
)
- EXO
可能调节受体的单核细胞促炎性分子的生产。这些结果显示,在
HBV
复制产生的
exosomes
的组成和潜在的功能,因此对外来病毒宿主相互作用提供了新的视角。
Figure S1 实验数据分析协议流程图(整体流程)
Figure S2
以