正文
压力波动的原因是系统无法提供稳定准确的流量。压力波动会造成保留时间漂移。保留时间受到多方面因素的影响,不可能做到100%控制所有的这些因素。小于+/-0.1min的保留时间波动在正常范围之内。但是如果超过这个范围,就说明哪儿出问题,需要引起注意了。【压力】
是液相色谱柱最重要的指标,要经常关注压力的变化。保留时间的变化经常是由于压力问题引起的。不同溶剂及时是在相同流速和温度的情况下压力也是不同的。
色谱柱堵时,确认可能造成堵塞的样品性质,相应选择合适的清洗溶剂。系统堵塞,首先应确认是那一部分堵塞,依据情况由后向前进行排除。压力波动
压力在短时间内剧烈波动。
a.泵头中有气泡;b.单向阀脏;c. 柱塞密封圈漏液。
容易发生堵塞的部位
1.保护柱和色谱柱
2.线路过滤器
3.混合气过滤组件
4.管路连接处
5.进样器
6.检测器流通池
举两个堵塞的例子
1.线路过滤器
故障:堵塞
现象:系统压力偏高
措施:异丙醇(或5%稀硝酸),超声波清洗
判断依据:关闭排液阀,断开出口管路,设定流速1mL/min,如压力>0.3MPa,则堵塞。
2.混合器过滤组件
漏液也会导致压力过低
经常漏液的部件:
1.泵: 柱塞密封圈、排液阀
2.手动进样器:转子密封圈磨损
3.检测器: 流通池窗口(垫片损坏、透镜破碎)
4.接头处漏液:(接头松动,接头脏,接头磨损,部件不匹配)
举个例子:单向阀的清洗
故障:宝石球或球座受污导致密封不好
表现:系统压力波动大
措施:
1. 打开排液阀,以异丙醇为流动相输液;
2. 拆下单向阀,放入异丙醇中,超声波清洗。
(注意:超声清洗时开口端向上放置。)
液相色谱压力低原因解析
压力异常如何判断是不是漏液?
压力异常升高相比压力异常降低作为液相色谱仪常见故障之一,有着其特殊性。我们可以通过设定压力上限值来监测及控制压力异常升高,只要实际压力没有升高到压力上限值,基本对我们的实验是不会造成太大影响的,而当实际压力超过压力上限值时,仪器会报警,我们就知道要排查系统堵塞故障了。而当仪器压力异常降低时,因为我们通常会把压力下限设置的很小,因此仪器不会自动觉察报警。这时,仪器就可能存在漏液了,我们的实验就会明显受到漏液的影响造成保留时间、面积重现性不好等诸多症状。
判断漏液位置-流路系统漏液?
此时我们需检查整个HPLC流路系统和进样系统是否存在漏液了。先检查整个流路系统,由于系统有漏液传感器,只要系统存在漏液,安装在各个模块上独立的漏液报警系统就会立刻检测到,并停止仪器运转给出具体模块的报警信息。柱温箱的报警系统:安装在这两个模块上的漏液报警系统是更为先进的气体传感器,考虑到柱温箱的温度较高,即使存在少许漏液也会立即被蒸发掉,以致普通的漏液传感器在此处就会显得有些力不从心。
先进灵敏的气体传感器,随时监测柱温箱里发生的不易觉察的渗漏。待传感器检测到特定模块漏液以后,我们须仔细查找漏点,如果漏点不是非常明显,我们可考虑借助滤纸来检查。待确定漏点后,我们即可判断是接头松动、刃环老化、柱塞杆密封垫老化还是管路连接不到位,并通过拧紧接头,更换刃环(更换刃环时请参照下图,在刃环前须留管路4-5mm),更换柱塞杆密封垫(请参照说明书或联系工程师)以及重新连接管路来排除。
进样系统漏液?
如果上述检查中没有发现任何漏液,而且压力仍然异常低的话,我们就要检查仪器的进样系统了。进样系统漏液多是由于内部的转子密封故障引起,因此通常它没有系统流路漏液那么好观察,尤其是自动进样器。
先从相对简单的手动进样器说起,当转子密封故障时,流动相会从进样口和两个废液口中的某个或某几个漏出,此时松开把手上的两个固定螺母,这样把手就会从轴上滑落,两个突出部分刚好与阀体上的调节螺母的狭缝相吻合。把此螺母旋转1/20周即可使转子密封与定子接触更加紧密。如果还漏,再重复上述操作。若还不行,更换转子密封(具体方法参见手动进样器说明书或联系工程师)。
对于自动进样器,当转子密封故障时,流动相会在仪器进样时从进样口渗出,如果漏液量较大的话,流动相还会从注射阀相连的各个出口漏出。此时,我们可以拆开进样阀连接的六路管路,松开进样阀的三根固定螺栓,卸下定子,超声清洗进样阀转子密封,再装回即可。如果问题仍未解决,那就需要更换了转子密封了。总之一句话,压力降低需查漏。
液相色谱压力不稳故障解析
四种情况会导致压力不稳
压力不稳是高压液相色谱仪(HPLC)最为常见的故障,总结原因不外乎以下四种情况: ⑴有气泡;(2)漏液;(3)单向阀不良;(4)泵工作相位不正确。
1.对于一这种情况:一般是在开机的一段时间内出现,往往是流动相在色谱柱内还没有平衡好、柱箱温度还没有恒定。这些都不属于仪器问题,只要多平衡一会就会稳定。若使用的是梯度程序,由于流动相的比例正处在变化中,压力也会跟随变化。
2.对于第二种情况:通过下面几步分析,很快就可以确定原因。首先排除气泡因素:气泡的产生是由于流动相中溶解了空气,在泵压的作用下空气会分离出来,气泡留在泵体内排不出去,它不仅影响到流量的准确,泵压也会不稳,这时我们只要打开排废阀,利用快速冲洗功能很快就能将气泡赶出。
为防止气泡产生,最好的办法就是使用在线脱气装置。没有脱气机时,流动相要经过脱气处理。超声波震荡是常用的除气泡方法,虽然简单但效果不佳,不妨将流动相用微孔滤膜多过滤两遍,利用真空泵的负压,将溶解在流动相中的空气释放出来,其效果要好些。
如果使用中我们发现,连接过滤头的输液管中有微小的气泡流动时,这说明过滤头有堵塞现象必须清洗,你可用10%的硝酸进行超声15分钟,如果还有气泡产生那就该换新滤头了。 其次,要检查的是输液泵有没有漏液现象,一般接在泵后的管道漏液会使压力降低,对压力稳定性影响不大。如果泵内柱塞垫或柱塞杆磨损了那就不一样了,它不仅压力上不去、变化大、流量也不足。只要观察到泵头或冲洗管漏液(有冲洗瓶时液位会升高),柱塞垫或柱塞杆肯定有问题。
3.第三是单向阀不良,当有盐份或者杂质等污染物附着在单向阀内球体和阀体表面时,就会破坏密封性,造成输液的单向性能降低,泵虽然在工作,但就是输送不好液体,严重时不能输液。反映到压力上,表现为严重不稳或没有压力。这时你可以卸下单向阀,用异丙醇超声清洗20分钟。如果有盐份,再用热水超声清洗一遍效果会更好。若清洗后还达不到要求,可将单向阀再接到流路上用大流量异丙醇冲洗。单向阀的结构比较精细,如果没有把握最好先不要分解清洗,用超声波清洗时要注意摆放的位置防止部件震散,否则装配后效果会不理想。当单向阀内的球体损伤时就只有更换了。
4.泵工作的相位问题:这种情况发生的比较少,可以通过调节泵的初始位置解决。以上四个方面基本包含了泵压不稳的所有原因,对于大多数用户只要顺着这个思路检查,一般的故障都能得到解决。
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