帕金森病是一种常见的神经系统变性疾病，主要病理为中脑黑质致密部多巴胺能神经元进行性变性丢失。今天米粒儿为大家分享一篇近期发表在oncotarget上的关于帕金森病分子机制研究论文，了解如何用我们熟悉的PI3K/AKT通路套路化帕金森病。（回复170727可下载文献，一周有效）
本论文中，作者研究CB-R2激动剂AM1241对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）诱导的帕金森病小鼠神经毒性的作用。AM1241处理后，PD小鼠脑中CB2R表达水平逆转，行为评分显著升高，且以上作用于多巴胺和血清素的剂量成正相关。
此外，western blot和免疫染色结果提示AM1241可显著活化PI3K/Akt/MEK通路，增强Parkin和PINK1的表达。mRNA 表达分析也证实AM1241提高CB2R表达并且活化Parkin/PINK1信号通路。
进一步的，作者发现黑质体中TH阳性细胞数目增加，表明在PD小鼠中，AM1241可重塑多巴胺能神经元。CB2R和多巴胺能神经元共表达表明AM1241可靶向结合CB2R可作为PD治疗的新靶点。
结果表明，选择性CB2R激动剂AM1241对PD小鼠具有显著的治疗效果，可引起多巴胺能神经元再生，可能的机制是AM1241通过影响CB2R表达活化PI3K/AKT通路。
下边我们了解一下这篇论文主要的表型和通路实验结果。
CB2R激动剂AM1241可减缓MPTP引起的运动缺陷
MPTP引发的PD小鼠体重降低，而当经过AM1241处理后，体重增加。AM1241处理前后，滚轴( rotarod) 测试结果也呈现显著差异。此外MPTP处理后引发的运动协调障碍，在加入AM1241后也显著性恢复。这些实验结果证明AM1241可显著逆转MPTP引发的运动缺陷。
CB2R激动剂AM1241可减弱MPTP引起的运动徐缓
大部分PD病人和MPTP引发的PD小鼠模型中，运动徐缓现象都会发生。本研究作用采用爬杆实验检测MPTP注射5天后运动徐缓现象。结果显示MPTP组明显需要更长的时间，而采用AM1241治疗后，爬杆时间剪短。
CB2R激动剂AM1241处理后小鼠脑中质粒浓度
AM1241处理30min后，脑中AM1241浓度最高，在60min时迅速降低浓度不及最高浓度的一半，而时间延长至360min后，AM1241浓度几乎为0（Fig2A）。而AM1241的最大质粒浓度出现在暴露60min时，在240min降低至0（Fig2B）。这些实验结果证明AM1241在体内代谢速度快，停留时间短。
CB2R激动剂AM1241处理后增加多巴胺和血清素表达水平
如图3A所示，MPTP处理后血清素（5-HT）水平显著降低。而AM1241处理后，5-HT浓度升高，且随着AM1241浓度增加，5-HT水平也增加。
如图3B所示，MPTP处理后，多巴胺水平也显著下降，但是AM1241处理后，多巴胺水平增加，当AM1241浓度为12mg/kg时，多巴胺水平几乎和对照组相同。
该实验结果证实AM1241可显著增加PD小鼠中多巴胺和血清素水平。
AM1241影响CB2表达且通过调节Parkin/PINK1和PI3K/AKT/MEK通路逆转PD
Parkin/PINK1和PI3K/AKT/MEK通路失活导致线粒体紊乱和氧化应激敏感。本文选择这两条通路为研究对象，采用western blot和免疫组化，qPCR的方法，测定了CB1，CB2，Parkin，PINK1, p-PI3K, 和p-AKT表达水平。在PD小鼠中，CB1，CB2，Parkin，PINK1, p-PI3K, 和p-AKT表达水平都下降。
然而这种效应可被AM1241显著逆转，且具有明显的剂量-效应关系。免疫组化和qPCR方法也获得了相似的研究结果。因此可推测AM1241通过Parkin/PINK1和PI3K/AKT/MEK通路治疗MTPT引起的PD。
参考文献：AM1241 alleviates MPTP-induced Parkinson’s disease and promotes the regeneration of DA neurons in PD mice
福利：长按识别下方二维码添加“文献菌”为好友，即日起至8月31日，春季班学员立刻获得【文献精读 秋季班】19.9元购买权益。（原价99元）
如果想看全部的文献精读课，可以扫下面的二维码购买课程录播（课程有效期至2018年12月31日），想怎么看就怎么看。
点击底部“阅读原文”，即可查看课程详情
