细胞因子对免疫的调控其实还是很有意思的，比如今天讲的这篇华中科技大学同济医学院韩军艳/黄亚非团队的博士，发表在Nature旗下21.8分的Cell Mol Immunol上的文章，讲的就是细胞因子在不同时期对于免疫细胞的影响：
首先，他们构建了新生儿和成年小鼠的哮喘模型，他们想要研究的是IL-33、TSLP和IL-25在不同时期对哮喘过程的影响，其实也就是对细胞免疫产生的影响。通过比较他们发现IL-33在早期过敏性哮喘中更为重要（这个其实就是通过表型和细胞因子表达，分析可能存在的联系性，这个也是柯霍氏法则的研究方法，不清楚柯霍氏法则的话可以看看《科研的推理和逻辑——从实验台到咖啡桌》、《轻松的文献导读》和《列文虎克读文献》）：
那么IL-33是否是对于小鼠的新生儿哮喘模型有重要的作用呢？他们通反向遗传学的方法，对IL-33进行了敲除，分析敲除小鼠中不同年龄时期对于哮喘的影响（不清楚反向遗传学的话，可以去看看《轻松的文献导读》，有介绍过，这也算是一种比较常见的研究基因功能的方法）。结果发现IL-33及其受体ST2的敲除，消除了新生儿组过敏性哮喘的发展。也就是说IL-33对于新生儿组小鼠过敏性哮喘有着重要的诱发作用：
那么在成年组的小鼠中呢，他们也进行了对应的实验分析，结果发现IL-33和ST2的敲除，只能部分抑制成人过敏性哮喘的发展。这可能就是IL-33造成不同时期过敏性哮喘差异的原因：
造成过敏性哮喘的主要免疫细胞，有两种一个是ILC2（II型固有淋巴细胞）另一种的Th2（这个就是CD4+ 的辅助型T细胞），他们分析了IL-33敲除后对于这两种细胞的影响。结果发现IL-33敲除后，成年小鼠和新生儿组小鼠的ILC2细胞反应都下调了，也就是说ILC2的细胞反应，与IL-33造成的不同时期的差异表现是没有关联性的：
而对于Th2细胞的话，成年组小鼠和新生儿组中，在IL-33敲除后产生了变化，IL-33/ST2的敲除，对于过敏原诱导的Th2细胞反应具有年龄依赖性影响。通过对于CD4+ T细胞在肺部的募集情况分析后发现， IL-33/ST2信号传导对于Th2细胞反应的年龄依赖性影响，有一部分是通过影响攻击期致敏CD4+ T细胞的募集和激活来介导的：
这些结果可以说明，IL-33/ST2信号转导，对新生和成年小鼠的过敏性ILC2反应尤为重要。但对于Th2细胞，IL-33/ST2 信号的缺陷仅显着影响新生儿组，而成年小鼠过敏性哮喘的发展对于Th2细胞反应的发展不依赖于IL-33/ST2 信号。那么，成年组小鼠的过敏性哮喘过程中，真的不需要Th2细胞了么？他们使用了Rag1敲除小鼠（去除了T细胞，其实也是为了排除T细胞的功能，明确IL-33），他们发现，在具有完整Th2反应的成年小鼠中，尽管IL-33缺陷导致ILC2反应减弱，但Th2细胞反应可能以某种方式，被某些维持过敏性哮喘过程的代偿机制触发。
DC细胞可以激活CD4+ T细胞，DC细胞对于CD4+ T细胞的影响分成了致敏期（在纵膈淋巴结中）和攻击期（招募到肺部），他们发现IL-33/ST2信号传导对Th2细胞反应的年龄依赖性影响，主要发生在攻击期。其中，IL-33/ST2信号对新生儿组小鼠的过敏原激发期肺DC细胞迁移和激活，是必不可少的：
过敏性气道炎症中肺DC的迁移和激活受多种细胞因子调节，尤其是2型警报蛋白（IL25、IL-33和TSLP），在IL-33信号传导敲除的情况下，成年小鼠的TSLP和IL-25的水平进一步升高，这也可能是IL-33缺失后产生的代偿机制。为了明确这个代偿机制在成年小鼠中的作用，他们使用了TSLP和IL-25的中和抗体进行了阻断（其实这也是柯霍氏法则的一个手段，为了明确表型与基因之间的关联性，通过移除基因，查看表型的变化，不清楚柯霍氏法则的话，可以看看《科研的推理和逻辑——从实验台到咖啡桌》、《轻松的文献导读》和《列文虎克读文献》），结果发现阻断TSLP的确可以抑制过敏性反应诱导的IL-33缺陷成年小鼠过敏性哮喘，由此证明了TSLP和IL-25在IL-33的缺失的情况下，在成年小鼠中的代偿作用：
为了确定LI-33影响的年龄相关的IL-33/ST2信号传导对肺细胞因子环境的影响，他们分析了新生ST2缺失后过敏原诱导小鼠的肺免疫细胞，他们发现肺γδ T细胞的比例远高于成年小鼠（γδ T细胞其实就是指的TCR，也就是T细胞受体，一般来说是αβ亚基，也有γδ亚基的，不清楚TCR信号通路的话，可以去看看《信号通路是什么鬼？》系列，介绍过TCR），而这些T细胞中，主要是IL-17A+ γδ T细胞。耗竭了肺中的γδ T细胞，可以逆转IL-33缺乏引起的过敏性气道炎症的抑制。IL-17A信号的缺失逆转了对IL-33缺陷引起的过敏性气道炎症的抑制，这种逆转同时伴随着肺部TSLP、IL-25等细胞因子水平的增加。也就是说肺γδ T17细胞，通过抑制TSLP和IL-25，介导了IL-33缺陷型新生小鼠过敏性气道炎症的抑制：
最后他们形成了这样的示意图，在幼年小鼠中IL-33/ST2的信号传导缺失，会导致IL-17A信号增强，激活的肺γδ T17细胞，通过抑制TSLP和IL-25，介导了IL-33缺陷型新生小鼠过敏性气道炎症的抑制。而成年小鼠中，IL-33/ST2的信号传导的缺失，不会影响肺中的γδ T细胞，这样就无法抑制TSLP和IL-25，从而产生了代偿作用，这样的代偿作用激活了DC细胞迁移到肺部，激活Th2引发了过敏性炎症反应：
这篇文章，其实思路上是很细致的，在每个步骤中，都有认证进行推理，才获得了最后的结果。解释了IL-33敲除后，在不同年龄阶段对过敏性哮喘的细胞表型。好了，今天就先策到这里吧，有兴趣的话可以看看原文，祝你们心明眼亮。
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