专访日本实验动物中央研究所首位构建基因修饰狨猴的Erika Sasaki 博士

2017年6月26-30日由冷泉港亚洲举办的Primate Neuroscience: Perception, Cognition & Disease Models学术会议在苏州举办。日本实验动物中央研究所的狨猴研究部部长Erika Sasaki 博士作为特邀嘉宾做了主题演讲：“Development of genetically modified marmoset models”。Erika Sasaki 博士是第一个构建基因修饰狨猴的模型的研究者，生物探索非常有幸在会后对她进行了采访。

1为什么选择狨猴做模型

Sasaki 博士告诉我们选择狨猴而不是其它猴子做研究模型，是因为狨猴个子比较小，性情比较温顺，这样比较好操作，容易作为研究对象。有些灵长类5年才产生一个下一代，而狨猴每年能生产4到6胎。选择它而不是其它灵长类，这是最主要的原因。

2构建转基因狨猴的方法

Sasaki 博士介绍构建转基因狨猴的过程并不复杂，他们通过将连有目标基因的载体注射到狨猴的胚胎里来实现转基因。但是为了避免制造出转基因失败的动物，他们通过同时转化融合的蛋白标记，在胚胎期就能检测获得的动物是转基因成功的还是失败的。比如用绿色荧光蛋白标记导入受精卵，如果获得胚胎是闪光的，他们就能判断转基因获得了成功，可以将胚胎移植到狨猴代母的体内。因此他们的成功率是接近100%的，这是最重要的一点。

我们向Sasaki 博士咨询他们是否采用现在较新的、CRISPR等基因编辑的方法来构建狨猴模型。Sasaki 博士的回答是肯定的，但她说她更倾向于用Zinc-finger或TALEN来靶向狨猴的基因。因为基因编辑的要求是要起作用非常快，当被注射入胚胎就会立即起效。但CRISPR/Cas需要较长时间来进行基因编辑。如果将CRISPR/Cas注射到单个细胞的受精卵，它要到4细胞或6细胞期的胚胎才起作用。所以CRISPR/Cas会产生嵌合的动物，他们也希望能解决这个问题。但到目前为止，她还是会倾向于Zinc-finger或TALEN。

3构建转基因狨猴花费的时间

Sasaki 博士说很难准确地回答构建一个转基因狨猴需要多久，如果只是要获得第一代的话，大概要花一年功夫。其中构建载体，检测是否有功效就花费了半年时间；然后就是注射胚胎的操作，到获得新生的狨猴再花6个月时间。所以总的来说要一年到一年半的时间。但是如果要将这种转基因狨猴实际运用到科研中去的话，往往需要好几个动物，所以需要繁殖这个转基因克隆。Erika Sasaki 博士说这一点就是比较艰难的，必须在他们性成熟之前获得纯和的第二代。他们希望开发出新技术来逾越过狨猴的性成熟，比如iPS细胞技术对细胞进行重编程。

4研究展望

Sasaki 博士介绍他们通常用基因修饰狨猴的模型来研究大脑的课题，比如日本的脑图计划。在日本关于认知和学习的研究，还有利用配子来制备干细胞的研究也都有兴趣运用基因修饰狨猴的模型来做。现在研究的领域也比以前拓展了。

Sasaki 博士认为永不放弃和对诚实对待科学数据对于做好科学研究非常重要。

Sasaki 博士觉得冷泉港亚洲是一场让人非常振奋的会议，全世界的研究者都来到中国，深入讨论课题，她很乐于其中。

冷泉港亚洲

冷泉港亚洲沿袭美国冷泉港实验室的传统，为来自亚洲乃至全球的科学家及学生们，提供近距离分享最新科研进展的独特平台。在冷泉港亚洲，与会者不论地位、年龄、国籍、性别、种族，都将于会议全程得到平等自由的交流机会。冷泉港亚洲会议的最大特色，就是大部分在会议上发表的演讲，选择自全体与会者公开提交的摘要中（年会除外），报告涵盖了大量未发表的最新科研进展。

冷泉港亚洲会议一般历时3-5天，由高密度的演讲分会、海报展示分会及各类社交活动组成。每一位演讲者的报告时间约为15-20分钟，台下听众将有5分钟的时间与演讲者进行交流问答。海报展示分会一般安排在下午，每一位作者都将有机会，就自己的研究成果及感兴趣的话题，与来自世界各地的学者们进行充分探讨。