开展HPV 基因检测项目的质量管理要点，重要！

宫颈癌是唯一病因明确，可早期预防，有望被消灭的一种癌症。几乎所有的宫颈癌都由HPV病毒感染引发，持续高危HPV感染是宫颈癌的主要病因。近年来，国内外出台相关指南，HPV基因检测成为主流的筛查技术。HPV基因检测技术经历了从不分型、部分分型（16/18分型）到拓展分型及定量的发展。目前，国家药品管理局（简称NMPA）获批试剂约80多个，预期用途为HPV核酸（DNA或RNA）的定性检测，涉及的方法学众多，以荧光PCR法和PCR杂交为主。

★ 国内HPV基因分型检测技术原理主要有：PCR+固态芯片杂交（导流杂交、微流控技术）、PCR+液态芯片杂交（流式荧光技术）、多重荧光PCR技术和二代测序技术。

★ HPV基因检测靶区有：

L1区：高度保守的区域，整合的过程中易删除或重组，大多数试剂均以L1为扩增靶区。

E1区：CPI/II

E6/E7区：与癌蛋白相关的基因，在重组整合的过程中相对稳定

HPV基因检测在实验室中的质量管理要点

分析前质量控制

1.样本采集：认真阅读试剂盒说明书，确认匹配的样本采集管、样本类型及样本采集要求。

2.样本接收：认真阅读试剂盒说明书，确认：

◆ 样本是否有污染、凝块、脂血、严重溶血、腐败、干涸等；

◆ 送检样本是否符合检验项目的要求，如样本取量是否满足检测项目的要求；是否正确使用相应保存液的采样管等。

※ 明确拒收标本的范围：采样时间过长、未及时送检或未置于冰箱保存等标本保存不当的情况。

分析中质量控制

1.可操作性的SOP文件。

2.试剂盒方法学的性能验证（以定性为例）

◆ 性能验证指标：重复性（精密度）、准确性（方法学比较）、分析特异性、检测下限或分析敏感性、抗干扰能力。

3.室内质控

◆ 质控品的选择：

可在日常检验中收集阳性样本或者购买第三方质控样本。

弱阳性质控品——选择浓度为试剂盒检出限2-4倍的样本

阴性质控品——日常检验的阴性标本

◆ 质控设置要求：

每批临床标本检测时，带入其中2-3种基因型较弱阳性样本以及阴性样本，随机放置于临床标本中间进行检测。在一定时间内将所有已有质控品的突变全部轮到。

※ 弱阳性质控样本检测为相应阳性，阴性样本为阴性，即为在控。否则为失控。

◆ 非统计学方法：

检测有效的质控判断方法：阳性检测为阳性（反应性），阴性检测为阴性（非反应性）。

◆ 常用质控统计学方法：

Levey-Jennings质控图

分析后质量控制

结果报告、解释及与临床沟通，帮助临床医生能够正确的理解和应用检验结果于患者疾病的诊断和治疗。