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液相色谱维护及LC-MS关机流程

色谱  · 公众号  ·  · 2025-01-24 07:15

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一、液相色谱假期前的维护
液相色谱在假期前进行全面维护,能有效延长仪器使用寿命、确保后续实验顺利进行。下面从不同部件详细介绍维护要点:
  1. 色谱柱维护

  • 冲洗 :若实验中使用了缓冲盐,先用 20 倍柱体积的低比例有机溶剂 - 水混合溶液(如 5% 甲醇水溶液)冲洗,以去除缓冲盐。之后,再用纯有机溶剂(如甲醇或乙腈)冲洗 10 倍柱体积,置换出水分,防止微生物滋生和固定相损坏。比如,一根 250mm × 4.6mm 规格的 C18 色谱柱,流速设为 1mL/min, 5% 甲醇水溶液 冲洗时间约 40 分钟,纯有机溶剂冲洗时间约 20 分钟 。

  • 保存 :冲洗完成后,将色谱柱从仪器上取下,两端用堵头密封。若长期不使用,应将色谱柱保存在纯甲醇或乙腈中,置于阴凉干燥处,避免阳光直射和高温环境。

  • 流动相系统维护

    • 更换流动相 :假期前若流动相已使用较长时间,需更换新鲜的流动相。特别是水相,易滋生微生物,尽量全部处理掉。

    • 清洗储液瓶 :将储液瓶取下,先用去离子水冲洗,再用适当的有机溶剂(如甲醇)润洗,最后用去离子水冲洗干净并晾干。对于含有缓冲盐的流动相使用后的储液瓶,更要彻底清洗,防止盐结晶残留。

    • 检查过滤头 :流动相过滤头可能会吸附杂质,影响流动相的输送。将过滤头从储液瓶中取出,用稀硝酸浸泡超声清洗 15 分钟,然后用去离子水冲洗干净,重新装回储液瓶。若过滤头污染严重,应及时更换。

  • 泵维护

    • 冲洗泵体 :拆下色谱柱,连上两通,用去离子水以 1mL/min 的流速冲洗泵 30 分钟。若泵常使用缓冲盐,可能有结晶,可适当提高冲洗液的温度,但不宜超过40℃,同时增加冲洗时间。再用有机溶剂(如甲醇或乙腈)冲洗20min。







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