外泌体快速分离新技术

exosomes · 公众号 · 医学 · 2017-07-11 17:33

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号外号外，一种新的外泌体快速分离与鉴定的方法被发表在《ACS NANO》上，这种技术相较于现有的分离技术而言又有什么优势呢，让我们一起看看吧。

技术的核心是一种交流电动（alternating current electrokinetic，ACE）微阵列芯片装置，该芯片的单个电极的侧视图和俯视图如下所示，一个设备中可有超过1000个电极，其表面涂覆薄薄一层多孔水凝胶，图中虚线所示DEP高场区即外泌体被富集的位置。

如下图在芯片电极处被富集的外泌体可直接用扫描电子显微镜（SEM）和免疫荧光等方法进行分析与鉴定。

该装置可以从未稀释的人血浆样品中快速分离获取外泌体，需要的样品量小，仅需30-50μL血浆样品，就能够在15分钟内将外泌体集中到微电极周围的高场区域。简单洗涤去除大量血浆物质后，使外泌体浓缩在微电极上。分离、洗涤及芯片荧光分析步骤在30分钟内就可以完成。

下面我们可以通过研究者们利用ACE微阵列芯片分离和回收胶质母细胞瘤患者血浆外泌体的实验来了解其作用。

其中 A. ACE微阵列芯片表面的亮视场图像。每个圆圈是60 μm的电极。B.交流电场开始作用前的荧光图像，其中被PKH26染成红色的外泌体成点状散布在整个画面中。C. 交流电场（10 Vpp,15 kHz）作用10分钟后的荧光图像。外泌体在微电极DEP高场周围聚集。 D.以1×TE缓冲溶液清洗去除其他物质后的图像，显示捕获的外泌体仍然集中于微电极DEP高场区。E.选择性RNA原位荧光检测后的红色绿色荧光复合图像。其中25%的红色荧光位置出现绿色荧光的RNA。F.外泌体被洗脱后的图像，被洗脱的外泌体可用于进一步研究与分析。