专栏名称: exosomes
旨在全面介绍exosome,并适时跟进最新研究。
目录
51好读  ›  专栏  ›  exosomes

外泌体快速分离新技术

exosomes  · 公众号  · 医学  · 2017-07-11 17:33

正文

号外号外,一种新的外泌体快速分离与鉴定的方法被发表在《 ACS NANO 》上,这种技术相较于现有的分离技术而言又有什么优势呢,让我们一起看看吧。

技术的核心是一种交流电动( alternating current electrokinetic ACE )微阵列芯片装置,该芯片的单个电极的侧视图和俯视图如下所示,一个设备中可有超过 1000 个电极,其表面涂覆薄薄一层多孔水凝胶,图中虚线所示 DEP 高场区即外泌体被富集的位置。




如下图在芯片电极处被富集的外泌体可直接用扫描电子显微镜(SEM)和免疫荧光等方法进行分析与鉴定。

该装置可以从未稀释的人血浆样品中快速分离获取外泌体,需要的样品量小,仅需30-50μL血浆样品,就能够在15分钟内将外泌体集中到微电极周围的高场区域。简单洗涤去除大量血浆物质后,使外泌体浓缩在微电极上。分离、洗涤及芯片荧光分析步骤在30分钟内就可以完成。


下面我们 可以通过研究者们利用 ACE 微阵列芯片分离和回收胶质母细胞瘤患者血 浆外 泌体的实验来了解其作用


其中 A. ACE 微阵列芯片表面的亮视场图像。每个圆圈是 60 μm 的电极。 B. 交流电场开始作用前的荧光图像,其中被 PKH26 染成红色的外泌体成点状散布在整个画面中。 C. 交流电场( 10 Vpp,15 kHz )作用 10 分钟后的荧光图像。外泌体在微电极 DEP 高场周围聚集。 D. 1×TE 缓冲溶液清洗去除其他物质后的图像,显示捕获的外泌体仍然集中于微电极 DEP 高场区。 E. 选择性 RNA 原位荧光检测后的红色绿色荧光复合图像。其中 25%







请到「今天看啥」查看全文