外泌体可作为肿瘤的诊断标志物

今天给大家带来的文章是《 DNM3, p65 and p53 from exosomes represent potential clinical diagnosis markers for glioblastoma multiforme 》

多型性胶质母细胞瘤(GBM)是由星形胶质细胞产生的最具侵袭性和致命性的原发性脑癌，并被分类为IV级。近年来，外泌体已被报道为多种癌症癌变和转移的重要中介体。然而，他们在GBM中的作用尚不明确。在本研究中，我们的目的是研究血液外泌体是否为GBM的潜在临床诊断标志。

为了探索体内的GBM外泌体，我们首先建立了具有原发和复发的人类GBM细胞的原位异种移植模型。如图1a所示,来自病人的GBM细胞被注入了老鼠的右大脑并最终形成了肿瘤。然后我们比较了正常小鼠和分别注射了原始的GBM细胞和复发的GBM细胞的小鼠的生存期。我们发现注射了复发性GBM细胞的小鼠的生存期明显少于注射了原始GBM细胞的小鼠[图1(b)]。此外，在注射后2个月，复发性肿瘤的体积大于原发肿瘤[图1(c)]，表明复发的肿瘤细胞比原始细胞更具侵略性。

在肿瘤细胞注射后2个月，我们比较了原发GBM小鼠模型在肿瘤细胞注射前后脑内33个基因表达的变化图[图2(a)]。通过实时PCR显示p65、DNM3和CD117这三个基因表达的上调幅度最大，PTEN、p53和ST14这三个基因表达的下调幅度最大[图2(b)]。

然后，我们比较了原发GBM小鼠模型在肿瘤细胞注射前后血液外泌体内33个基因表达的变化图[图3(a)]。通过实时PCR显示p65、DNM3和CD117这三个基因表达的上调幅度最大，PTEN、p53和APC这三个基因表达的下调幅度最大[图3(b)]，这与图2b所示相似。

我们之前的数据显示复发性肿瘤细胞比原发肿瘤细胞更具侵略性，所以我们想知道复发GBM小鼠模型脑和血液外泌体的mRNA表达是否和原发GBM小鼠模型有差异。通过实时PCR监测，我们发现复发GBM小鼠模型在肿瘤细胞注射前后脑内p65、DNM3和LLGL2这三个基因表达的上调幅度最大，PTEN、p53和ST14这三个基因表达的下调幅度最大[图4(b)]。而在复发GBM小鼠模型血液外泌体内，p65、DNM3和ZEB1这三个基因表达的上调幅度最大，GATA2、p53和ST14这三个基因表达的下调幅度最大[图5(b)]。

我们对图2、图3、图4、图5所得结果进行了分析，发现在原发GBM小鼠模型脑内肿瘤和血液外泌体内DNM3、p65和CD117这三个基因的表达均上调，而PTEN和p53这两个基因的表达均下调[图6(a)]。在复发GBM小鼠模型脑内肿瘤和血液外泌体内DNM3和p65这两个基因的表达均上调，而ST14和p53这两个基因的表达均下调[图6(b)]。综上所述，我们的研究结果表明，在原发和复发的GBM异种移植中，DNM3和p65在肿瘤部位和外泌体内表达均上调，而p53表达下调。蛋白质免疫印迹结果也验证了这一结论[图6(c)]。