（1）原理
正常人的 ACTH 分泌有昼夜节律，早上 8 时最高，晚上最低。
患有库欣病或异位 ACTH 综合征时，血浆中 ACTH 测定值高于正常，并且昼夜节律消失。
而肾上腺肿瘤由于自主分泌皮质醇，对垂体的 ACTH 分泌有明显的反馈性抑制，导致血浆中 ACTH 的测定值低于正常。
因而可鉴别 ACTH 依赖性和 ACTH 非依赖性库欣综合征。
（2）方法
早晨 8 点空腹取血测定 ACTH，需重复测定 2~3 次。
用预冷的 ETDA 试管收集血浆样本，取血后置于冰水中立即送至实验室低温离心测定。
（3）结果判断
显性异位 ACTH 综合征患者的 ACTH 水平高于库欣病，但库欣病和隐性异位 ACTH 综合征之间的 ACTH 水平存在重叠，难以区分。
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ACTH 非依赖性库欣综合征：
早晨 8 点的 ACTH < 10 pg/mL（2.2 pmol/L）。但某些肾上腺性库欣综合征患者的皮质醇水平升高不明显，不能抑制 ACTH 至上述水平。
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ACTH 依赖性库欣综合征：
早晨 8 点的 ACTH > 20 pg/mL（4.4 pmol/L）。
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其他情况：
如 ACTH 为 10~20 pg/mL（2~4 pmol/L），宜进行去氨加压素兴奋试验（DDAVP）或促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）兴奋试验进一步鉴别。如 ACTH 和皮质醇均升高时，还要考虑到垂体促肾上腺皮质激素腺瘤的可能性，需要行 DST、LDDST 和 HDDST，甚至行双侧岩下窦静脉取血（BIPSS）+ DDAVP 兴奋试验，以明确诊断。
大剂量地塞米松抑制试验（HDDST）
（1）原理
库欣病时，垂体瘤细胞分泌 ACTH，对大剂量糖皮质激素的反馈性抑制作用仍有一定保留。
而异位 ACTH 肿瘤细胞不受此负反馈抑制，肾上腺肿瘤的皮质醇分泌不受 ACTH 控制且 ACTH 水平已被明显抑制，故大剂量地塞米松不抑制异位 ACTH 肿瘤和肾上腺肿瘤引起的皮质醇水平升高。
在小剂量地塞米松抑制试验的基础上（不受抑制者），进行本检查有助于区别库欣病、肾上腺肿瘤、异位 ACTH 综合征。
（2）方法
用药前留取标本检测血皮质醇或 24 小时 UFC 的基础值，然后口服地塞米松 2 mg，每 6 小时 1 次，共 2 天（< 40 kg 儿童地米松的剂量为 120 ug/kg/日），在服药的第 2 天留 24 小时尿测定 UFC，或早晨 8 时取血测定血清皮质醇，并与服药前的基础值对比。
过夜单次服药法：也可以一次性于午夜 23~24 点口服地塞米松 8 mg，在服药前、后日的早晨 8 时取血测定血清皮质醇。
（3）结果判断
用药后测定值比基础值降低 < 50% 时为被抑制。库欣病患者 90% 可被抑制（诊断敏感性为 60~80%，特异性为 80~90%），异位 ACTH 综合征或肾上腺肿瘤患者 90% 不被抑制。
某些分化较好的神经内分泌肿瘤如支气管类癌、胸腺类癌和胰腺类癌可能会与库欣病类似对此负反馈抑制较敏感。
去氨加压素（DDAVP）兴奋试验
（1）方法
静注去氨加压素 10 μg，于用药前及用药后 15、30、45、60、90、120 分钟取血测定 ACTH 和皮质醇。
（2）结果判断
给药后血皮质醇升高 ≥ 20%，血 ACTH 升高 > 35% 为阳性反应。
（3）注意
DDAVP 容易获得且价格便宜，无显著不良反应，但其诊断敏感性及特异性均不高，目前临床并未广泛应用。
CRH 兴奋试验
（1）原理和方法
给予外源性 CRH 后，库欣病患者的 ACTH、皮质醇及其代谢产物升高，而异位 ACTH 综合征或肾上腺肿瘤患者不受药物影响，因而可以鉴别库欣病与异位 ACTH 综合征。
