液相色谱优化—分离度的优化

我们开发分离方法时，首先用一个通用的方法筛选色谱柱，选择一款分离最好的色谱柱。因为选择因子α是分离度的最重要的影响因素。

我们经常遇到这种情况，样品很复杂，组分太多，这个时候就有可能出现色谱柱峰容量不够的问题，所谓峰容量也就是在一定分析时间内，可有效分离的峰的数量。

那么峰容量不够我们该如何解决呢？

1. 使用更长的色谱柱：较长的色谱柱通常具有更高的理论塔板数和载样能力，从而提高峰容量。
2. 选择内径更小的色谱柱：内径小，相当于分辨率就高了，但进样量要适当减少哦。
3. 减少进样量：有时由于进样量过大，导致峰展宽，这时减少进样量可以有效改善峰型，增加峰容量。
4. 使用高效填料：采用更小粒径的填料可以增加柱效，间接提高峰容量，但可能需要调整流动相的流速以保持柱效。
5. 样品前处理：通过样品净化、或目标物的富集等预处理步骤，减少样品中杂质的干扰。
6. 梯度洗脱：如果适用，使用梯度洗脱可以更有效地分离复杂样品，同时可能提高峰容量，因为它允许在分析过程中改变溶剂的极性，帮助快速洗脱高浓度样品。

分离度差，我们可以调整流动相的比例，降低洗脱强度，或者梯度洗脱时，放缓梯度来增大分离度。

峰拖尾时，会导致分离度变差，如何改善峰拖尾可以参考 液相色谱常见问题解析之峰拖尾 。