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你想做的chip启动子是怎么找到的?

解螺旋  · 公众号  · 医学  · 2017-04-02 18:01

正文

Discussion写作模板 | SCI作图 | qPCR曲线 | 自噬相关mTOR信号 | ELISA实验

作者:凌风(转载请注:解螺旋·医生科研助手)


你知道启动子在哪里么?


LncRNA的研究炙手可热哇,表观遗传学机制方面你不得懂一点?


不管是高大上的chip还是荧光素酶报告基因,都少不了启动子的序列,那么问题来了,启动子区的序列你会查么?



图文解析来啦,这是小编最常用的方法啦,接地气,用神器----ucsc!

1.打开ucsc,小编一般都用hg19版本,在下图中搜索明星分子BCL-2(why?因为它出名哇!!)。



2. 接下来你就看到这一堆堆线条,不对啊,bcl-2这个基因怎么显示的这么勉强,那就zoom out吧!zoom out 是缩小,这怎么记住呢?你想啊,你站的远看到的就多啦,是不是就能看到它的全貌了? 是不是就把眼前的缩小了呢?



3.站得远,看的清了,你就可以看到这个基因的全貌了,一般我们认为启动子很有可能是在TSS前2kb,或者TSS后1kb位置,所以我们就先看一下基因的转录方向,从起始不为前后各拉一段( 敲黑板,划重点! )。拉多长,你可看到那个标尺?根据标尺大小适当的拉~



诺,就是像这样,大致拖个范围出来,就会弹出下面的框框,点zoom in 放大



5.大致看一下,这个范围拉的还算合理,那我们就要取序列了,点“view”,再点“dna”,翻页再点“getDNA”就可以得到了!



6.有了序列,再把外显子部分序列标注出来,你就可以随心所欲的来挑选设计启动子区引物了~如果你不会查外显子序列,那你就再往下看看:







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