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NETs检测之小成

生信菜鸟团  · 公众号  · 生物  · 2024-09-25 12:30

正文

前面我们有讲NETs在肿瘤转移中的作用 髓系免疫:为乳腺癌的转移铺路?,那在实验层面我们如何来进行相关的检测呢?

中性粒细胞胞外陷阱(NET)是中性粒细胞衍生的胞外支架,是由DNA、组蛋白、蛋白酶和炎症因子组成的丝状胞外结构。

Sørensen OE, Borregaard N. Neutrophil extracellular traps - the dark side of neutrophils. J Clin Invest. 2016;126(5):1612-1620. doi:10.1172/JCI84538

2016年,NETosis markers: Quest for specific, objective, and quantitative markers总结了比较全的NETs检测手段。


但当真正实践起来以后,有的检测似乎已经不太“时兴”了。

例如,文中提到的用ELISA检测MPO-DNA和NE-DNA复合物,这在当时被认为是监测 NETosis 的最特异、客观和定量的检测方法。但是目前大多数ELISA试剂盒是独立于DNA的单纯的MPO/NE试剂盒,相当于是单纯的颗粒酶检测。

毕竟时隔8年,这些年NETs相关的研究也很火,有没有一些新的方法出现或者原有的方法被改进呢?我们今天来找找看~

当我们拿到这样一个关键词的时候,到底应该如何着手去找寻答案呢?

——「Connected Papers」

这样好像有利于我们快速掌握该领域的核心文献,再顺藤摸瓜,找到前沿文献~


de Buhr N, von Köckritz-Blickwede M. How Neutrophil Extracellular Traps Become Visible. J Immunol Res. 2016;2016:4604713. doi:10.1155/2016/4604713


免疫荧光是应用比较广泛的一项检测:

Li Y, Wu S, Zhao Y, et al. Neutrophil extracellular traps induced by chemotherapy inhibit tumor growth in murine models of colorectal cancer. J Clin Invest. 2024;134(5):e175031. Published 2024 Jan 9. doi:10.1172/JCI175031



还有MPO-DNA ELISA检测:

Du X, Ren B, Li C, et al. PRL2 regulates neutrophil extracellular trap formation which contributes to severe malaria and acute lung injury. Nat Commun. 2024;15(1):881. Published 2024 Jan 29. doi:10.1038/s41467-024-45210-5

Zhan X, Wu R, Kong XH, et al. Elevated neutrophil extracellular traps by HBV-mediated S100A9-TLR4/RAGE-ROS cascade facilitate the growth and metastasis of hepatocellular carcinoma. Cancer Commun (Lond). 2023;43(2):225-245. doi:10.1002/cac2.12388


综合来看,NETs的核心检测指标主要包括:

  • 「循环游离DNA (cfDNA)」

  • 「中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE)」

  • 「髓过氧化物酶 (MPO)」

  • 「瓜氨酸化的H3组蛋白 (Cit-H3)」

无论是用免疫荧光还是ELISA,均可以围绕这几项指标展开~