前面我们有讲NETs在肿瘤转移中的作用 髓系免疫:为乳腺癌的转移铺路?,那在实验层面我们如何来进行相关的检测呢?
中性粒细胞胞外陷阱(NET)是中性粒细胞衍生的胞外支架,是由DNA、组蛋白、蛋白酶和炎症因子组成的丝状胞外结构。
Sørensen OE, Borregaard N. Neutrophil extracellular traps - the dark side of neutrophils. J Clin Invest. 2016;126(5):1612-1620. doi:10.1172/JCI84538
2016年,NETosis markers: Quest for specific, objective, and quantitative markers
总结了比较全的NETs检测手段。
但当真正实践起来以后,有的检测似乎已经不太“时兴”了。
例如,文中提到的用ELISA检测MPO-DNA和NE-DNA复合物,这在当时被认为是监测 NETosis 的最特异、客观和定量的检测方法
。但是目前大多数ELISA试剂盒是独立于DNA的单纯的MPO/NE试剂盒,相当于是单纯的颗粒酶检测。
毕竟时隔8年,这些年NETs相关的研究也很火,有没有一些新的方法出现或者原有的方法被改进呢?我们今天来找找看~
当我们拿到这样一个关键词的时候,到底应该如何着手去找寻答案呢?
——「Connected Papers」
这样好像有利于我们快速掌握该领域的核心文献,再顺藤摸瓜,找到前沿文献~
de Buhr N, von Köckritz-Blickwede M. How Neutrophil Extracellular Traps Become Visible. J Immunol Res. 2016;2016:4604713. doi:10.1155/2016/4604713
免疫荧光是应用比较广泛的一项检测:
Li Y, Wu S, Zhao Y, et al. Neutrophil extracellular traps induced by chemotherapy inhibit tumor growth in murine models of colorectal cancer. J Clin Invest. 2024;134(5):e175031. Published 2024 Jan 9. doi:10.1172/JCI175031
还有MPO-DNA ELISA检测:
Du X, Ren B, Li C, et al. PRL2 regulates neutrophil extracellular trap formation which contributes to severe malaria and acute lung injury. Nat Commun. 2024;15(1):881. Published 2024 Jan 29. doi:10.1038/s41467-024-45210-5
Zhan X, Wu R, Kong XH, et al. Elevated neutrophil extracellular traps by HBV-mediated S100A9-TLR4/RAGE-ROS cascade facilitate the growth and metastasis of hepatocellular carcinoma. Cancer Commun (Lond). 2023;43(2):225-245. doi:10.1002/cac2.12388
综合来看,NETs的核心检测指标主要包括:
「循环游离DNA (cfDNA)」
「中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE)」
「髓过氧化物酶 (MPO)」
「瓜氨酸化的H3组蛋白 (Cit-H3)」
无论是用免疫荧光还是ELISA,均可以围绕这几项指标展开~