(1)
样品制备:
测定硝态氮和铵态氮的土壤样品,若在采样3d内分析测定,则可保存在4℃条件下,不然可-20℃ 条件下贮存待测。
(2)
待测液制备:
称取过2mm筛的新鲜土样50.00g于500ml,浸提瓶中,加 0.5g硫酸钙和 250.0mL水,用振荡机振荡 30min,将悬液上清液用干滤纸过滤,澄清的滤液用干燥洁净的瓶收集。如果滤液因有机质而呈现颜色,可加活性炭除之。同时制备空白溶液。
(3)
标准曲线:
分别吸取10mg/l硝态氨标准溶液
0.00 ml、1.00mL、2.00mL、5.00mL、10.00mL、15.00mL、20.00ml,
于蒸发皿中,加 0.05g碳酸钙,在水浴上蒸干,到达干燥时不应继续加热。冷却,迅速加人 2.0ml酚二磺酸试剂,将蒸发皿旋转,使试剂充分接触蒸干物。静止 10min 使充分作用后,加 20.0mL水,用玻璃棒搅拌直到蒸干物全部溶解。冷却后缓缓加人1:1氨水,并不断搅拌,至溶液呈微碱性(溶液显黄色),且多加2.0mL,以保证氨水试剂过量。然后将溶液完全地转移入100ml 容量瓶中,加水定容,获得的标准系列溶液浓度为
0.00mg/L、0.10mg/L、0.20mg/L.0.50 mg/L1.00mg/L、1.50mg/L、2.00mg/。
在分光光度计上用1cm比色皿在波长 420nm 处进行比色,以0.00mg/L标准溶液为参比溶液调节仪器零点,由低到高测定标准系列浓度的吸光值。
(4)
测定:
吸取待测液 25mL-50mL(含硝态氮 20mg/L-150mg/L)于蒸发皿中,加 0.05g碳酸钙,在水浴上蒸干,到达干燥时不应继续加热。冷却,迅速加入 2.0mL酚二磺酸试剂,将蒸发皿旋转,使试剂充分接触蒸干物。静止 10min 使充分作用后,加 20mL水,用玻璃棒搅拌直到蒸干物全部溶解。冷却后缓缓加入1:1氨水,并不断搅拌,至溶液呈微碱性(溶液显黄色),且多加2.0mL,以保证氨水试剂过量。然后将溶液完全地转移人100mL容量瓶中,加水定容。在分光光度计上用1cm 比色皿在波长420nm处进行比色。
式中:
WN硝态氮(NO3--N)含量,单位为毫克每千克(mg/kg);
C从工作曲线上获得的待测液的硝态氮浓度,单位为毫克每升(mg/L);
C0从工作曲线上获得的空白溶液的硝态氨浓度,单位为毫克每升(mg/L);
V显色液体积,取100mL;
ts-分取倍数;
M鲜-鲜土土样质量,单位为克(g);
K-由鲜土土样换算成烘干土样的水分换算系数;
V1-待测液体积,单位为毫升(mL):
V2-吸取待测液体积,单位为毫升(mL);
M烘-烘干土样质量,单位为克(g)。
两次测定结果允许相对偏差小于8%