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微生物实验时平板接种菌之后没有菌落生长的情况分析

FDA食安云  · 公众号  ·  · 2024-08-10 06:00

正文


我们做微生物实验的时候,常用平板接种菌落,经常会遇到在给平板接种菌之后却没有菌落生长的情况。今天,我们来分析一下出现这种情况的原因。本文将从菌种、人员操作、培养基和添加剂三个方面来分析。

一、菌种原因




  1. 菌种老化: 菌种如果经过连续频繁的传代达十几次甚至几十次,就会造成菌种老化,岀现生长缓慢甚至不生长的情况。

  2. 野生菌种: 相比于 标准菌株 ,有一些野生分离的菌种本身比较脆弱,对营养要求比较高,对外界不良环境也比较敏感,难以在普通的平板上生长,往往需要加入特殊的营养物质。

  3. 菌种没有进行充分活化: 当我们拿到一株菌的时候,该菌种往往是处于—个保藏状态的,这就需要我们通过合适的培养基来逐代扩大培养,得到活力旺盛的菌株,所以充分活化的目的就是要让菌种逐渐适应培养环境,从而在平板上快速生长。

  4. 样品中的菌: 有的样品中本身含菌量就较少,如水样、供试液等,接种量低造成平板上无菌生长。还有的样品中含有一些抑菌成分,会杀死样品中的菌,导致无菌落生长。

  5. 购买的商品化菌株: 有一些商品化的菌株,如益生菌、菌肥、可食用真菌等,本身进行过基因改造,不能进行连续传代扩大培养,故在平板上难以生长。


二、人员操作不当




1、容器未洗刷干净,残留的抑菌成分导致菌不生长。

2、培养基配置过程中称量错误,加入添加剂比例错误等。

3、过度灭菌,有很多培养基成分不耐高温,过度灭菌会导致成分失效。

4、调pH值错误,不同温度下培养基的pH值也会不一样,未正确的调配pH值,也会导致菌不生长。

5、在实验操作过程中失误,特别是在稀释菌液过程中少接或者错接菌。

6、未放置合适的培养条件,根据不同菌对氧气的需求程度,可以分为需氧、厌氧、微 需氧培养 等。根据不同菌对温度的需求,又可以在25°C、30°C、35°C、42°C、56°C等不同温度下培养。

三、培养基及添加剂原因







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