在完全相同的实验条件下，注入未知样品，得到欲测组分的响应值。根据已知的系数f，即可求出欲测组分的浓度。
操作：
将已知量的内标样加入标准样品，制成混合标样，并配制一系列的已知浓度的工作标样。混合标样中标样与内标样的摩尔比不变。注入色谱柱，以（标样峰面积/内标样峰面积）为响应值。根据响应值与工作标样浓度之间存在的线性关系，即W=f×A，制成标准曲线。
网友七嘴八舌：
- 有时候确实柱压不同会对结果有影响，但这是柱压差别很大的情况才会发生。是不是柱子没冲洗好，或者需要看是否进气泡了，因为这都可能导致结果不准。
- 如果柱压的差别很大的话，比如30bar已经很大了，平时用的时候，有柱温箱，一般都控制温度恒定的，基本同意条件不会有这么大的变化，最多10bar上下浮动，通常小于5bar。
- 是不是走过缓冲盐的流动相？用水低流速长时间冲洗，再换乙腈冲洗试试看。是不是有些不物残留在柱子中没有及时冲洗导致柱压偏高，可以尝试用异丙醇试试。
- 柱压变化主要会影响保留时间，对峰面积影响不大。你所说的重复性不好，是液相进同一个样品重复不好还是不同的样品。如果不同的样品那是你反应的问题。至于选择性超过100%？是否是计算方法错误？
- 简单来说，计算苯二酚的选择性：
假设对苯峰面积代入标准曲线得浓度C1(g/ml)；邻苯峰面积对应浓度C2，苯酚峰面积对应浓度C，溶液总体积V，稀释倍数20，初始苯酚加入量m(g),如下
