前面我们讲到miRNA 5’端2-8个碱基被称为miRNA种子序列。通过种子序列与靶 mRNA 的 5'-UTR和3'-UTRˊ区实现。miRNA的作用机制主要表现为降解或抑制靶基因的表达。常用的microRNA数据库和预测软件很多,这里我们继续介绍
权威性microRNA数据库
的查询方法。
1
.进入主页,网址
http://www.microrna.org/
microrna/home.do
。点击
miRNA
,可以预测相应靶基因。点击
Target mRNA,
可以输入基因名称预测可能结合
microRNA
。比如输入
microRNA
名称
has-mir-21
,
选择物种,
homo sapiens
。
2.
进入可看到如下界面,选择
view targets
,查看靶基因列表。
3.
以下便是
has-mir-21
可能作用的靶基因。
4
.点击第一个基因
CLCA3P
后
alignment details
,可以查看
has-mir-21
与
CLCA3P
的结合位点。
5.
不仅如此,网站还列出了与
CLCA3P
基因不同位置可能结合的其他
microRNA
。
1.
进入主页,网址:
http://www.mirdb.org/
。网站既可以预测
microRNA
靶基因,也可以通过基因预测可能结合的
microRNA
。比如输入
microRNA
名称,
has-mir-21,
选择物种,
human
。
2.
选择
has-mir-21-3P targets
。
mirna
前体会产生两条互补的有功能的成熟
mirna,
他们分别靶向不同的位点,即
5p
与
3p
的种子序列是不同的。
3.
以下便是
has-mir-21
可能作用的靶基因
,
共
485
个。遗憾的是,网站不提供预测基因下载,只能手动复制到
excel
表格。
1.
进入主页,
网址:
http://www.targetscan.
org/
vert_71/
选择查询物种,输入
mir-21
名称。
2.
进入查询结果页面,可以看到预测的靶基因列表。同时,可以查询到
miRNA
与靶基因可能结合位点。
3.
点击
Download table,
下载靶基因预测列表。
通过以上三个网站,我们可以得到microRNA预测的靶基因。每个网站预测的靶基因以及靶基因的数目是不同的,首先想到的分析这些数据库预测靶基因的共同交叉基因以及对这些基因进行功能富集分析。下面呢,简单介绍一下如何预测靶基因的共同交叉基因,即
维恩图
的绘制。
1.
网址:
http://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html
2.
在列表中,输入基因名称(建议输入基因全称)。然后维恩图自动绘制完成,点击交集中数字,可以在
Result
中,查看集合中详细的基因名称。
最后呢,是视频版教程。希望对大家有所帮助。
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