2017年6月22至23日、6月30日至7月1日在武汉生物技术研究院分别举办了华中区流式技术交流会第二波-实验课程I、II,此次的试验课程依旧以小班形式开展,多采用课堂讨论的形式。大家针对试验过程中遇到的胞内因子染色、灵活多色配色、裂红液的选择、死细胞排除、固定与保存等发表了自己的看法,学员也积极分享了他们在实验过程中遇到的各种糟心,比如肝癌组织单细胞悬液的制备、血液样本PBMC制备过程中的疑难排查等等,并收获到大家的解决建议。
小编就实验课中有意思的几个部分为大家整理了些ppt:
1、样本前处理
样本前处理绝对是完美流式图谱呈现过程中最为关键的一步,血液往往是最易得、处理起来最简单的样本,你还了解/处理过什么类型的样本?
贝克曼的侯风青博士将可用于流式分析检测的样本做了一个小结(侯博仅从临床检测方面入手做的归纳,其实流式能检测的还有植物、软体动物、昆虫、藻类、微生物等等)。
而在血液样本前处理时,依据检测目的选择合适的试剂,方能确保检测结果的可信度。
2、多色配色
多色应该算是流式检测的常规分析项目了,武汉生物技术研究院平台的刘颖博士为大家介绍了多色的抗体选择方法及注意事项。
3、上机小tips
达科为技术工程师张松柳结合样本上机过程,与大家分享了几个实例:
3.1 不同裂红液裂解人外周血:左右两图分别为两种不同裂红试剂作用后的PBMC散点图,关键点在于了解裂红液的配方(尤其是否含有固定剂)。
3.2 含固定剂的裂红液对7AAD的影响:固定之后细胞死亡,染7AAD阳性增多(因此使用的裂红液若含有固定剂,后续不能使用7AAD或者PI作为死活细胞的染料)。
最后附上此次试验课程的现场图。
此次的流式技术交流会到此就已经全部结束了,感谢各位前来参会的同仁们,一路有你,一路相随!
武汉生物技术研究院位于东湖国家自主创新示范区武汉光谷生物城内,成立于2009年8月29日,由湖北省委、省政府整合武汉大学、华中科技大学、华中农业大学、中科院武汉分院等高校、科研院所的优势资源组建而成的新型的科研/产业型研究院,其下设立的技术平台部已搭建以第三代测序为核心的基因测序分析,生物质谱检测及分析,生物核磁分析及筛选,细胞分选及显微成像,细胞/化合物高通量筛选,高性能运算与生物信息分析,生物发酵及制备,蛋白纯化及晶体解析共计八大设备平台,以及以基因组学、转录组学、表观组学、蛋白组学、代谢组学为支撑的综合性组学技术中心。近四年来,累计服务全国超过400个企事业单位、高校、科研院所,年均检测样本数超过15000个,服务客户超30000人次。承担国家十一五,十二五重大新药创制科技重大专项,国家病毒病防治重大专项等多项重大课题。