自2017年CAR-T细胞疗法获得FDA批准用于血液肿瘤治疗以来，细胞治疗在临床应用和商业化方面取得了显著成功。目前，更多细胞疗法（如干细胞、NK细胞、巨噬细胞和红细胞等）相继获得临床认可，为疾病治疗提供了新的解决方案。然而，原代免疫细胞的核酸递送效率低下是一个关键问题，不仅影响临床应用，也给实验室研究带来挑战。因此，开发高效安全的核酸递送系统变得尤为重要。本文将探讨原代细胞转染的各种方法，重点介绍基于内源蛋白纳米颗粒的核酸递送系统——ProteanFect。
Agarwalla, P., et al. Nature Biotechnology 40, 1250–1258 (2022).
免疫细胞核酸递送难题
首先，免疫细胞的细胞膜对外源物质的通透性较差，限制了核酸的有效进入。尽管某些核酸可以通过内吞作用进入细胞，但往往会被困在内吞体内，难以释放到细胞质中，从而影响基因表达。此外，核酸进入细胞核的能力也相对较弱，尤其是DNA，需要克服核膜的屏障，这对其有效转运构成挑战。在转染过程中，尤其是针对T细胞等免疫细胞，转染方法可能触发细胞的免疫反应，导致大量细胞凋亡，从而减少成功表达外源基因的细胞比例。此外，原代细胞群体的多样性和异质性使得转染效率在不同细胞间差异显著，进一步增加了核酸递送的复杂性。因此，开发出高效、低毒且适用于多种细胞类型的核酸递送系统显得尤为重要，以支持细胞疗法的进一步发展和应用。当前，细胞治疗中常用的核酸递送方法包括慢病毒转染、脂质体转染、电穿孔技术等。然而，这些方法各自存在一定的局限性。
脂质体：转染方法简单方便，但在原代细胞中的转染效率通常较低（低于5-10%），并可能引发炎症反应和细胞毒性，限制其应用效果。
慢病毒：虽能有效将核酸整合至细胞基因组，但制备过程复杂且成本高，存在潜在致瘤性风险，这使其在某些临床应用中受到限制。
电穿孔技术：虽然可以实现部分原代细胞的快速转染，但常导致细胞膜损伤，影响细胞增殖和基因表达的持续性。此外，电穿孔的效率受多种因素影响，难以实现操作的标准化。
ProteanFect核酸递送系统
针对原代细胞核酸递送面临的挑战，西湖凝聚体推出了全球首个基于内源蛋白纳米颗粒的核酸递送系统——ProteanFect系列转染试剂，旨在高效解决这一难题。作为新一代核酸递送系统，ProteanFect是一种非病毒、非电转、非脂质体的转染试剂，能够高效且低毒性地转染多种核酸类型。其核酸递送原理包括：核酸药物与内源蛋白自动组装形成纳米颗粒（ProteanFect-核酸复合物），随后通过细胞的主动摄入高效进入细胞；进入细胞后， ProteanFect-核酸复合物可快速释放核酸分子；释放后的核酸在胞内行使功能，内源蛋白被天然降解。
在转染过程中，ProteanFect系列转染试剂对细胞温和，有效保持细胞的活力和功能。其操作简便，无需特殊设备，使得高效转染变得轻松可行。此外，ProteanFect的适用性广泛，能够在多种原代细胞及难转细胞系中实现卓越的外源基因递送与表达。
高效表达：能够在多种原代细胞（如T细胞、NK细胞）及细胞系中实现卓越的外源基因递送与表达核酸载量高：支持多种核酸分子的共递送，提升整体转染效率操作简单：让原代细胞转染变得像HEK293一样简单适用性广：广泛适合于多种原代细胞和难转细胞系，且具备线性放大的能力，满足不同实验需求安全性高：使用内源蛋白，无免疫原性风险，转染过程对细胞的损伤小
使用ProteanFect系列转染试剂可高效转染RNA至多种原代细胞
结语
西湖凝聚体生物技术公司始终致力于为全球科研工作者提供创新的基因递送解决方案。ProteanFect的问世，标志着我们在这一领域迈出了关键的一步。为庆祝ProteanFect的正式上线，我们推出首批50份试用装名额，可在“西湖凝聚体”公众号申请免费试用装，数量有限，先到先得！
ProteanFect，等你来开启转染新体验！
