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稳定性与效率的完美结合:热稳定FGF

医麦客  · 公众号  ·  · 2024-12-17 07:20

正文

2024年12月17日

医麦客新闻 eMedClub News


FGF(成纤维细胞生长因子)是一类包括20多种肝素结合蛋白的家族,通过结合并激活靶细胞上的高亲和力FGF受体(FGFR)发挥作用。FGF激活的信号通路会导致多种效应,如有丝分裂、分化、迁移、血管生成、伤口愈合等。


重组FGF的挑战

在生物学研究中,FGF家族的重组蛋白常用于各种细胞培养应用。然而,由于重组蛋白的热稳定性问题,这些蛋白在37°C条件下会逐渐降解。例如, FGF-basic(bFGF)在37°C条件下的半衰期约为8小时 。这会导致活性bFGF水平迅速变化,影响神经干细胞(NSC)的生长速率和分化,因此需要频繁补充bFGF,从而增加工作量和成本。


为了提高FGF的热稳定性,Gibco与PeproTech推出了经过工程改造的热稳定的FGF蛋白,在细胞培养条件下表现出更高的稳定性和生物活性。以bFGF为例, Gibco™ PeproTech™ 的热稳定bFGF蛋白 经过工程改造,在细胞培养条件下表现出卓越的稳定性,并展现出以下优势:


“超长待机”: 37℃条件下保持生物活性达5天(vs. 8h),减少额外的培养基更换或高浓度添加bFGF的成本

“无缝替换”: 可直接替换您当前使用的bFGF,易于使用

初心不变”: 与天然bFGF相比,拥有 大于90%的序列同源性 ,并保留了肝素和FGF受体结合位点



与天然PeproTech重组bFGF相比,热稳定bFGF重组蛋白在37℃热激后仍能保持持续的活性。 PeproTech热稳定bFGF(货号:100-18BHS)和天然bFGF(货号:100-18B)均为重组蛋白,且分别在4°C或37°C下储存120小时,然后用于测量BALB/3T3细胞的增殖。两款产品在4°C下显示出相似的生物活性,但热稳定bFGF在37℃储存120小时后仍能保持持续的活性。热稳定FGF-基本的预期ED50范围为0.05–0.25 ng/mL。


除了在37度下显示出更优的稳定性外,经过我们研发人员的对热稳定bFGF的测试后,发现:


细胞扩增效率

相同的5 ng/mL bFGF培养条件下, 添加了热稳定bFGF的神经干细胞(NSC)倍增时间更短,而5 ng/mL的热稳定bFGF增殖效率相当于20 ng/mL的天然bFGF。


热稳定FGF表现出更高的细胞扩增效率



肿瘤细胞微球生长速度


在不含bFGF、含10 ng/mL天然bFGF或10 ng/mL热稳定bFGF的无血清成球培养体系中,不换液培养8天后,含有热稳定bFGF的培养体系中所生长的肿瘤细胞微球体积最大。


热稳定性bFGF无需频繁换液即可增加肿瘤细胞微球的生长速度。


除了热稳定bFGF外, Gibco还推出了热稳定的FGF-10,并同样展现出优异的性能。


热应激后的活性


经过72小时37℃的热激处理后,Gibco热稳定FGF-10展现出更高的活性。通过PrestoBlue HS细胞活性分析检测MCF7细胞增殖,确定热稳定FGF10的活性。


从应用上面,FGF-10细胞因子的添加在类器官研究中具有重要意义,并能与 Gibco™ OncoPro™ 肿瘤类器官培养试剂盒 完美契合,以支持肿瘤类器官 大量 长期稳定 均一的 扩增培养。


Gibco™ OncoPro™ 肿瘤类器官培养试剂盒 兼容悬浮和包埋培养 ,可用于至少 6 种肿瘤类器官培养,包括结肠癌、肺癌、乳腺癌、子宫内膜癌、头颈癌、胰腺癌。



热稳定FGF提升了细胞培养的稳定性和效率,为生物研究提供了强大的工具。无论是在细胞增殖、干细胞培养,还是肿瘤研究中,热稳定FGF都展现出其独特的优势。其优越的性能、更高的效率和易用性,使得热稳定FGF成为生物研究中的重要选择。


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