来自Molecular Instruments®（MI）公司的创新HCR™ RNA-ISH技术平台引入了条件核酸自组装的概念，是唯一一种经过优化的无需破坏性酶/蛋白酶消化的检测方法，能够保存组织形态，与现有IHC/IF检测方法具有天然兼容性，并具有直接的图像分析功能。MI推出自动化（HCR™ Pro RNA-ISH）和手动原位杂交（HCR™ Gold RNA-ISH）测定的试剂盒，提供与明场和荧光显微镜兼容的探针，定制探针可免费设计。该产品已应用于学术研究，药物开发，临床病理和诊断中的生物成像。
Molecular Instruments®官网：https://www.molecularinstruments.com/。
图1. HCR™ RNA-ISH技术发展史及主要的两个产品系列。
HCR™ RNA-ISH的工作原理
图2. HCR™ RNA-ISH的工作原理
检测阶段
AnHCR™ probe set comprises multiple probe pairs that hybridize to different subsequences along the target. Initiator i1 is split between each pair of probes such that only probe pairs that hybridize specifically to the target RNA colocalize the full initiator i1.
扩增阶段
AnHCR™ amplifier comprises metastable fluorescent hairpins h1 and h2. Specifically bound probe pairs that colocalize full initiator i1 trigger growth of a tethered fluorescent amplification polymer.
自动背景抑制
HCR™ probes and amplifiers combine to provide automatic background suppression throughout the protocol: probes that bind non-specifically do not colocalize full initiator i1 and do not trigger amplification; hairpins that bind non-specifically are kinetically trapped and do not trigger amplification.
HCR™ RNA-ISH的工作流程
HCR™ RNA-ISH产品
实验结果图片
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