摘要：
乳腺癌是全世界发病和死亡的主要原因。它是中国第三大常见恶性肿瘤，也是癌症相关死亡的第五大原因。化疗是乳腺癌最常见的治疗方法。在大多数情况下，其失败是由于化疗耐药，导致肿瘤进展，从而导致癌症相关死亡的主要原因。 然而，乳腺癌化疗耐药的详细机制依然不是很清楚。
在我们以前的研究中，我们证明TRPC5的瞬时受体电位通道表达升高诱导乳腺癌细胞的化学耐药性。抵抗化疗的这种能力可通过含有从化疗耐药细胞释放的TRPC5的细胞外囊泡（EV）转移到化疗敏感性的乳腺癌细胞，导致获得性化疗抗性。此外，来自接受化疗的乳腺癌患者的外周血中发现含有EV的TRPC5，但未接受化疗的患者未发现含有EV的TRPC5。 因此，因为这种可行的办法在化疗前无法预测化疗前的化疗耐药性，所以我们旨在评估含TRPC5的EV作为化疗抗药性的潜在生物标志物。
表1
：研究人群的基线水平，研究人群：血清MUC1水平大于10 ng / mL的且不可切除的转移性乳腺癌（CT扫描显示直径大于1厘米）接受一线化疗。
图1
：CirExo-TRPC5水平与乳腺癌组织中TRPC5表达水平相关。 CD63是一种外泌体存在的标记物，Western印迹显示在来自患者血浆的外泌体颗粒中存在CD63，MUC1和TRPC5
（图1a）
。Western印迹显示，单独使用蛋白酶K处理时，外泌体中的b-肌动蛋白水平不变，而连用蛋白酶K和Triton X-100处理时外泌体中的b-肌动蛋白水平减少
（图1b）
。进一步免疫荧光染色在血浆外泌体检测CD63，MUC1和TRPC5时显示出不同的荧光强度，而在没有外泌体或一抗的情况下没有观察到荧光
（图1c）
。不与外泌体或一级抗体孵育的乳胶珠被认为是对照。这些结果图一表明患者血浆中的外泌体含有MUC1和TRPC5蛋白。
图2：
免疫组织化学染色显示不同乳腺癌组织中TRPC5表达水平
（图2a）
，流式细胞术（FCM）在不同患者血浆中显示出不同的cir-Exo-TRPC5水平
（图2b）。
Pearson相关分析显示乳腺癌组织TRPC5表达水平与cir-Exo-TRPC5水平呈正相关
（图2c）
。在通过western印迹检测的cirExo-TRPC5水平和通过FCM检测的cirExo-TRPC5水平之间观察到类似的正相关性
（图2d）
。
表2
显示了cirExo-TRPC5水平和乳腺癌患者特征的相关性。化疗前cirExo-TRPC5水平显着与化疗结局呈负相关。
图3：
应答者和无应答者的cir-Exo-TRPC5水平的中位数分别为38.5和56.6，应答者的cirExo-TRPC5水平显着低于无应答者水平。
（图3a）
。进一步的Pearson相关分析显示，初始cirExo-TRPC5水平与肿瘤收缩率呈显着负相关（
图3b
），在接受化疗的前两个周期中，40例PD患者（P = 0.41）和91例CR / PR / SD（P = 0.47）患者未发现化疗前及化疗后cirExo-TRPC5水平变化（
图3c，3d
）。
