CRISPR/Cas9系统在基因编辑领域是老大哥一般的存在，该系统通过sgRNA将Cas9核酸酶带到特定的DNA序列，切割双链DNA，利用细胞自身的DNA修复机制进行编辑。尽管这一系统很强大，但是脱靶效应、编辑精确度限制及DNA双链断裂引发的不完全或者错误的修复，这些问题一直困扰着科研工作者。
2019年，哈佛大学的David Liu教授团队为了更好的解决CRISPR/Cas9系统的这些问题，创造性的提出了引导编辑（Prime Editing, PE）这一概念。与传统的CRISPR/Cas9技术相比，PE在引入特定的DNA序列变化方面更为精准，避免了双链断裂，减少了潜在的副作用和不完全修复的问题。
PE系统的核心组件包括3个组分：
靶向载体guide RNA（pegRNA）：包含了引物结合位点（Primer binding site,PBS）区域，还携带了逆转录的模板序列（RTT），可以将想要的序列编辑进基因组。
nCas9（H840A）：一种变异的Cas9蛋白，切割Spacer序列（靶点序列）互补链，减少了双链断裂的风险。
逆转录酶（MLV）：利用RTT（反转录模板），从nCas9切开的DNA链的3’端开始反转录出一条编辑后的单链。
在pegRNA的引导下，nCas9（H840A）与MLV逆转录酶融合蛋白会到达基因组上的目的序列，并对含PAM的靶DNA链进行切割（pegRNA的非互补链）。此后，PBS序列与被切割的目标DNA链互补配对，逆转录酶即从端口空缺处启动逆转录。逆转录产物（DNA）即包含所期待的编辑突变。这段逆转录DNA会入侵并进入基因组DNA，发生整合，并进行切口的修复。只要RT序列允许，那么就可以采用此原理完成碱基的点突变（任意转换或颠换）以及片段的插入和缺失。
2020年3月，中国科学院遗传与发育研究所高彩霞课题组在
Nature biotechnology
上发表了一篇题为“Prime genome editing in rice and wheat”的研究论文。通过密码子、启动子和编辑条件的优化，在水稻和小麦中成功实现了包括单碱基替换、短序列删除等精准编辑类型的多位点编辑。
图 PPE系统示意图(Lin et al., 2020)。
1、基因编辑载体：1份质粒、1份大肠杆菌菌液（25%甘油菌）；
