IVD前沿：膀胱癌无创检测的创新突破

近日，杂志Scientific reports上发表了一篇题为“Diagnostic performance of Uromonitor and TERTpm ddPCR urine tests for the non-invasive detection of bladder cancer”的文章。Uromonitor和TERTpm ddPCR均可检测尿液中的热点突变。本研究旨在比较uTERTpm ddPCR、Uromonitor和尿液细胞学的诊断性能，并探讨BC风险亚组之间检出率的差异。 研究结果表明，uTERTpm ddPCR的检出率最高。uTERTpm ddPCR在所有BC亚组中产生了最高的灵敏度。对于HG NMIBC，将uTERTpm ddPCR与细胞学相结合几乎可以检测到所有病例，与两种独立检测相比，显著提高了BC的检出率。

最终纳入了142例有完整数据的患者，包括94例BC患者和48例对照。大多数BC病例是原发的（78.7%）而不是复发的。原发性BC包括42例pTa（14例高级别（HG）， 28例低级别（LG））， 17例pT1（15例HG， 2例LG）和15例pT2期的MIBC（16.0%）。

液滴数字聚合酶链式反应（ddPCR）能够灵敏地检测样品中痕量的DNA。最近开发了一种基于ddPCR的尿液TERTpm （uTERTpm）分析方法，用于检测两种最常见的C228T和C250T突变以及罕见的CC242-243TT、C228A和A161C突变。Uromonitor是一种实时PCR检测方法，可检测尿液中的各种热点突变，包括TERTpm （C228T和C250T）、FGFR3突变（R248C和S249C），以及KRAS突变（G12/13和Q61）。

在94例确诊的BC患者中，76例uTERTpm尿检阳性，50例细胞学阳性，47例Uromonitor尿检阳性（下图a）。43例BC患者Uromonitor和uTERTpm ddPCR检测均为阳性，14例BC患者均为阴性。uTERTpm ddPCR检测鉴定出33例Uromonitor阴性患者（其中30例为Uromonitor靶向的C228T或C250T突变），而Uromonitor鉴定出4例uTERTpm阴性的BC患者（均为FGFR3突变阳性，未被ddPCR靶向）。

uTERTpm ddPCR和Uromonitor假阳性分别为5例和3例。最常见的突变是C228T和C250T，其次是A161C、C228A和CC242-243TT。只有3例BC患者有罕见的uTERTpm ddPCR突变，但不伴有C228T或C250T突变。

uTERTpm ddPCR突变等位基因分数（MAFs）与肿瘤组织学亚组相关。LG NMIBC患者的MAF（中位数为2.66%）明显低于HG NMIBC（29.18%）或MIBC（27.88%）（下图b）。在原发性BC中观察到类似的结果（下图c）。

LG NMIBC中uTERTpm明显优于其他测试，但联合测试提高了HG NMIBC的检出率。与单独uTERTpm（88.2%）和细胞学检测（70.6%）相比，uTERTpm ddPCR联合尿液细胞学检测HG NMIBC的比例更高（97.1%）。相比之下，Uromonitor联合细胞学检查也提高了HG NMIBC的检出率（76.5%）。然而，Uromonitor并不能提高88.2%的uTERTpm检出率。

uTERTpm ddPCR对所有BC (80.9%)以及原发性(79.7%) BC病例的检测均有较高的灵敏度，相比之下，尿细胞学检查(53.2%和59.5%)和Uromonitor (50.0%和56.8%)灵敏度较低(如下表)。尿细胞学显示最高特异性（95.8%）。当根据EORTC进展风险对NMIBC病例进行分层时，uTERTpm ddPCR在检测所有风险水平的患者方面都具有优势。当对所有BC和原发病例的活跃吸烟者和前吸烟者进行分层时，与细胞学和Uromonitor相比，uTERTpm ddPCR对LG NMIBC保持了高灵敏度和特异性。