“飞”凡探索系列讲座：细节决定成败，深入解析流式实验的关键因素

流式检测中配色注意什么？

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了解流式细胞仪的配置

仪器有哪些激光器和滤光片，可以激发哪些荧光染料，可以检测哪些荧光信号；不同荧光染料有各自不同的特点。

• 抗原表达量与荧光染料亮度相匹配

1. 提前了解蛋白靶标在样本中的表达量，同时了解荧光染料的亮度。表达量很低的靶标需要搭配亮度高的荧光素。

1. 串联染料的信号衰退会降低APC或PE的灵敏度，最好选用更稳定的串联染料。

2. 避免样本暴露于光、高温或固定剂。如果样本需要固定，请选择十分稳定、有效组织串联染料的信号衰退的固定剂。

1. 这是因为自发荧光在波长较长时迅速降低。在自发荧光很强的细胞上，建议选择红光激发和APC标记的抗体。