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负峰原因总结

色谱  · 公众号  ·  · 2025-01-05 19:10

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1. 流动相相关原因 ① 流动相与样品溶剂的吸收差异: 如果流动相在检测波长下有吸收,并且进样溶剂(样品溶解液)的吸收低于流动相,就可能产生倒峰。 例如,在紫外检测中,当进样溶剂是水,而流动相含有在检测波长下有吸收的有机成分(如甲醇)时,205nm下进样时就可能出现倒峰。 因为水的吸收比流动相甲醇吸收小,在检测器处信号强度出现短暂下降,导致倒峰。

②流动相的两相的吸收差异:比如下图中,220nm下,乙腈/TFA水溶液等度条件,最后提高乙腈比例,由于乙腈的截止波长190nm比较低,因此会出现基线下漂,然后回到等度条件,基线又上移一段,所以会出现一段负峰。

③流动相中有气泡:气泡在流动相中会干扰光路或者改变流动相的物理性质。当气泡通过检测器时,可能会使检测器接收到的信号突然降低,从而产生倒峰。这在使用梯度洗脱时更为常见,因为梯度变化可能会引起空气的溶解度发生变化,导致气泡析出;还会致使系统压力发生变化,使得空气得以进入检测器。






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