专栏名称: 生物极客
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高活性Cas9 guide RNA设计工具助力科研!

生物极客  · 公众号  · 生物  · 2017-06-07 13:41

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生物极客按: 有效的gRNA 设计 工具, 们进行基因编辑有着重要的意义,来自哈佛大学的 GM Church 课题组在 Acs Synthetic Biology 上,开发的 SgRNA Score2.0 ,可以用于包括SaCas9等多种sgRNA的预测,方便人们更好的利用基因组编辑工具。




文解

目前已 经有多个课题组评 估了数百到数千个 sgRNA 的相关的序列特征并且已 经创 建了公开的可用 件来帮助研究人 员进 sgRNA 选择。来自 GM church 课题组开发的 sgRNA Scorer 1.0 2015 7 布以来,共有超 7000 个独立用 87 个不同的国家的研究人 员进 行使用。



然而随着CRISPR 域的不断深入,科学家 从其他 菌物种中 CRISPR ,同 也开 了相 的真核 编辑 的能力 . 然而,如果一个一个不同的cas9 验证 的工作量非常的 大。因 目前的策略需要需要 每个要分析的 CRISPR 蛋白 生和 测试 sgRNA 序列文 因此,科学家 新的工具 试图预测 多种 CRISPR 蛋白 中的 sgRNA 活性。



科学家们构建了 支持向量机(SVM)模型 ,用来评价其他三个Cas9同源物和一个非Cas9系统----Cpf1的预测能力。

首先科学家们合并了SpCas9(133高,146低)和St1Cas9(82高69低)的高活性和低活性sgRNA序列,产生215个高活性和215种低活性sgRNAs 。随后,将这430个sgRNA序列用作新的SVM的基础。我们的新模型的10倍交叉验证产生了73.7%的精度,72.8%的精度和75.8%的回收率,这与以前的SpCas9和St1Cas9的各个型号相当。科学家们评估新模型预测SpCas9和St1Cas9的sgRNA活性的能力。使用以前生成的靶基因座测序的预测数据,我们重新计算了这些sgRNA,发现我们的新旧模型之间的预测分数与SpCas9的相关性为0.997,St1Cas9的相关性为0.940,表明将来自两种不同的Cas9直向同源物对每个Cas9的预测能力没有不利影响。


1.科学家们大胆推测不同crispr系统之间sgRNA活性的相关性,从而极大的拓展了使用。

2.科学家们使用SVM支持向量机,从而识别活性背后潜在的规律。方便更好的预测。

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