浙江大学医学院附属第一医院Cell子刊研究，以解决临床问题为目的进行技术开发，堪称转化研究的典范！

今天我们介绍一项浙江大学医学院第二附属医院发表在Cell 子刊《Cell Reports Medicine》期刊上的研究 CD70-targeted iPSC-derived CAR-NK cells display potent function against tumors and alloreactive T cells靶向CD70的诱导多能干细胞来源的CAR-NK细胞在肿瘤和异体反应性T细胞中表现出强大的功能:

本研究开发了靶向CD70的诱导多能干细胞（iPSC）来源的CAR-NK细胞（70CAR-iNK），通过多基因编辑整合CD70靶向CAR、高亲和力CD16和IL-15融合蛋白。研究发现，70CAR-iNK细胞对多种肿瘤细胞展现出强大的细胞毒性，并能有效清除异体反应性T细胞，显著改善体内持久性和抗肿瘤效果。研究以CD70为靶点，通过改造CAR-NK并证明了对肿瘤和反应性T细胞的有效性，堪称转化研究的典范！

这个研究的起点是CAR-T细胞疗法在临床应用中面临的挑战。CAR-T细胞疗法虽然在某些血液肿瘤中取得了显著的疗效，但它的应用范围有限，且制造过程耗时、成本高昂。此外，CAR-T细胞需要使用患者自身的T细胞进行定制化改造，这不仅限制了其适用性，还可能导致治疗延迟和失败。因此，研究团队需要开发一种更通用、成本更低且能快速应用的细胞疗法。

基于这些临床问题，研究团队开始思考如何利用自然杀伤（NK）细胞来开发一种通用的免疫细胞疗法。NK细胞具有天然的抗肿瘤能力，且不依赖于T细胞受体（TCR），这使得它们成为开发通用细胞疗法的理想候选。然而，NK细胞的抗肿瘤功能可能会受到肿瘤细胞表面NCR/NKG2D配体减少的影响，导致肿瘤细胞逃脱。因此，研究团队设想通过靶向CD70来增强NK细胞的抗肿瘤能力。CD70是一种在多种肿瘤细胞上高表达的免疫检查点分子，且与肿瘤的不良预后相关。

为了验证这一设想，研究团队首先分析了多个肿瘤类型中CD70的表达情况，发现CD70在多种血液肿瘤和实体瘤中均有高表达，这表明CD70靶向疗法具有广泛的潜在应用前景。接下来，研究团队尝试通过基因编辑技术敲除NK细胞中的CD70基因，以防止NK细胞之间的相互杀伤（fratricide）。实验结果显示，CD70基因敲除并未影响NK细胞的功能或分化过程，这为后续的基因编辑NK细胞的开发提供了可行性。

基于这些初步发现，研究团队进一步开发了一种多基因编辑的诱导多能干细胞（iPSC）衍生的CAR-NK细胞（70CAR-iNK）。这些细胞不仅携带CD70靶向的CAR分子，还整合了高亲和力非可切割的CD16（hnCD16）和IL-15受体/IL-15融合蛋白（IL15RF），以增强抗体依赖的细胞毒性（ADCC）和细胞的持久性。通过一系列体外实验，研究团队发现70CAR-iNK细胞对多种肿瘤细胞表现出强大的细胞毒性，尤其是在CD70高表达的肿瘤细胞中。

为了进一步验证70CAR-iNK细胞的临床潜力，研究团队在多种肿瘤异种移植小鼠模型中进行了实验。结果表明，70CAR-iNK细胞能够显著控制肿瘤的进展，并延长小鼠的生存时间。这些实验结果不仅证明了70CAR-iNK细胞的抗肿瘤能力，还展示了其在体内环境中的持久性。

然而，研究团队意识到，要实现通用细胞疗法，还需要解决异体移植中的免疫排斥问题。研究团队注意到，激活的T细胞会高表达CD70，这可能成为免疫排斥的一个关键因素。因此，研究团队推测70CAR-iNK细胞可能通过靶向CD70来消除受者体内的异体反应性T细胞，从而减少免疫排斥。实验结果证实了这一假设，70CAR-iNK细胞能够有效清除激活的T细胞，并在异体T细胞存在的情况下保持持久性。

通过这一系列的实验探索，研究团队不仅解决了NK细胞在肿瘤治疗中的局限性问题，还为开发通用细胞疗法提供了一种新的策略。