编者注：
本文来自于公众号“生化笔记”
，看原作者如何妙笔生花。
生物化学（特指湿化学，干化学不讨论）经过这么多年（
100
年？）的发展，还是没有脱离朗伯比尔定律的束缚；而血常规里的血红蛋白（
HGB
）的测定，很多机器依然是比色法，
既然是比色法，那么同样遵循朗伯比尔定律。
什么是朗伯比尔定律？朗伯比尔定律应用的前提是什么？我没有翻教科书直接百度出来的：
朗伯——比尔定律(Lambert-Beer law)是分光光度法的基本定律，是描述物质对某一波长光吸收的强弱与吸光物质的浓度及其液层厚度间的关系。
比尔—朗伯定律数学表达式：
A=lg(1/T)=Kbc
A为吸光度；
T为透射比
(
透光度
),
是出射光强度（
I
）比入射光强度
(I0)；
K为摩尔吸收系数
.
它与吸收物质的性质及入射光的波长λ有关；
c为吸光物质的浓度
,
单位为
mol/L
，
b
为吸收层厚度，单位为
cm
。【
b
也常用
L
替换，含义一致】
应用前提：
(1) 入射光为平行单色光且垂直照射；
(2) 吸光物质为均匀非散射体系；
(3) 吸光质点之间无相互作用；
(4)辐射与物质之间的作用仅限于光吸收
,
无荧光和光化学现象发生。
查看某国产品牌血常规说明书，HGB测量原理如下：
从上面三张图中可以看出来，白细胞和HGB共用一个分析通道，测量白细胞数目的同时也测量出血红蛋白的浓度，血红蛋白浓度的测量是遵循朗伯比尔定律的。记得我自己大学实验课就是用
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分光光度计测量血红蛋白浓度，相信老一辈检验人也是用这种方法测量血红蛋白浓度的吧。
铺垫了这么多，开始切入正题：
脂血、黄疸、溶血、WBC、
PLT
、
RBC
都影响
HGB
的结果吗？
溶血：本身测量HGB就是要破坏红细胞的，所有
没有影响；
RBC: HGB存在于
RBC
中，所以说
HGB
的浓度和
RBC
的数量有关系，但是
不能称作是影响；
WBC:假设白细胞计数为
a
×
10^9
个
/L
，根据上面的测量原理，计算在
HGB
比色池中存在的白细胞个数；
全血模式：比色池中最终剩余的全血体积=6-52.08*（
1/417.6
）
=5.8752
≈
6
微升；
比色池中最终的液体体积=6+2500-52.08+500=2953.92≈3000微升；
比色池中最终的WBC浓度=（6*10^-6*a*10^9）/（3000）=6a个/微升；
预稀释模式：比色池中最终剩余的全血体积=40*（
1/10
）
-60/625=3.904
≈
4
微升
比色池中最终的液体体积=40+2460-60+500=2940≈
3000
微升；
比色池中最终的WBC浓度
=
（
4*10^-6*a*10^9
）
/
（
3000
）
=4/3*a
个
/
微升约等于
1.3
个
/
微升；
根据工作常识，正常人0
60
个
/
微升；
而当急性白血病的时候，a可能
>100
也可能＞
500
，这时候比色池中白细胞浓度将高达
5000
个
/
微升，想必这时候比色池中全部是白细胞颗粒了。
既然白细胞是颗粒，那么回到朗伯比尔定律上，这个溶质就不是均一的了，颗粒会对入射光进行漫反射，不再适用朗伯比尔定律，最终结论是：
高白细胞计数是影响HGB的结果的。
