广州中医药大学第二临床医学院近期在
Pharmacological Research
上发表研究成果：
A sinomenine derivative alleviates bone destruction in collagen-induced arthritis mice by suppressing mitochondrial dysfunction and oxidative stress via the NRF2/HO-1/NQO1 signaling pathway
（
青藤碱衍生物通过
NRF2/HO-1/NQO1
信号途径抑制线粒体功能障碍和氧化应激，减轻关节炎小鼠的骨破坏
）
回顾下之前解读过的文章，中药单体研究想发高分有几种思路：
1
）老药新用：
如之前解读的
Science
上（
IF
：
44.7
）的文章（
复旦大学青蒿素新发现登上Science！中药研究掌握这5步，高分文章思路一下就打开了~
），开发治疟疾青蒿素的新用途，治疗多囊卵巢综合征。
2
）临床角度新颖：
如之前解读的
Signal Transduction and Targeted Therapy
（
IF
：
40.8
）
上的文章（
中山大学团队IF 40.8新成果！思路满足这四步，中药研究轻松发高分~
），在化疗和免疫治疗联用过程中经常使用控制化疗副作用的辅助药物，他们在辅助药物中找到了一个中药活性成分，然后研究其是否会阻碍治疗。
3
）机制新颖：
如之前解读的
Signal Transduction and Targeted Therapy
（
IF
：
40.8
）
上的文章（
第二军医大学IF 40.8成果！中药成分+lncRNA， 仅需四步轻松get中药快速发文思路~
），一般中药成分的靶点都是蛋白分子，但他们做的是
lncRNA
。
今天要解读的这篇文章的研究思路
是找到在临床有效的中药单体，对其进行修饰改造，以加强药效。
下面让我们看看，他们都做了哪些工作吧。
一、研究背景
疾病：
类风湿性关节炎（
RA
）导致的骨破坏
表型：
线粒体功能障碍和氧化应激
中药单体：
青藤碱（
Sino
）是从中药清风藤中提取的生物碱，在临床上具有抗炎和骨保护作用，但需要高剂量才能发挥疗效。为了克服这一限制，他们开发了一种新的
Sino
衍生物
——SINX
。
二、研究结果
（
1
）
SINX
在体外抑制破骨细胞分化并减少滑膜炎症
1
）破骨细胞分化
实验处理
：小鼠骨髓巨噬细胞（
BMMs
）诱导其分化为破骨细胞，用不同浓度
SINX
进行处理。
结果
：
SINX
显著减少破骨细胞标志物（如
TRAP
阳性细胞、
F-actin
环），抑制骨吸收坑形成，下调破骨细胞相关基因（如
CTSK
、
MMP9
、
Oscar
等），阻断破骨细胞分化的各个阶段。
2
）抗炎作用
实验处理
：培养
RA
成纤维样滑膜细胞（
RA-FLS
），
SINX
处理。
结果
：
SINX
显著降低促炎因子（如
TNF-α
、
IL-1β
和
IL-6
）的水平。
（
2
）
SINX
在体外减轻线粒体功能障碍与氧化应激
实验处理：
SINX
处理破骨细胞的转录组测序
+
破骨细胞实验验证
+
关节炎小鼠模型验证
+
细胞机制研究
结果：
SINX
抑制线粒功能障碍基因（如
Cox5a
、
Uqcrfs1
）的异常表达，减少
ROS
生成，来减轻线粒体功能障碍与氧化应激。具体机制是激活
NRF2/HO-1/NQO1
通路。
（
3
）
SINX
显著改善
CIA
小鼠的骨骼破坏
实验处理：
使用胶原诱导性关节炎（
CIA
）小鼠模型，模拟人类
RA
病理特征。
结果
：
SINX
显著改善
CIA
小鼠临床关节炎症状，通过减少炎性细胞浸润、抚平软骨和减少骨侵蚀改善病理变化，改善关节形态，抑制骨破坏基因表达。
SINX
激活
NRF2/HO-1/NQO1
通路减少
ROS
生成，减轻线粒体功能障碍与氧化应激，从而改善类风湿性关节炎骨破坏。
以上就是这篇文章的主要内容了，整体看下来，虽然指标做的很多，但有些环节没讲清楚，比如：
（
1
）
SINX
的直接作用靶点是？
文章中用的是蛋白质
-
蛋白质相互作用（
PPI
）网络
+
实验验证得出线粒体功能和氧化应激相关基因是其分子靶标。但这种论证并不严谨。
PPI
网络主要描述的是蛋白质之间的相互作用关系，而不是直接反映
SINX
与蛋白质之间的相互作用。如果要找到
SINX
的直接作用靶点，需进一步验证。如，可以根据
SINX
处理前后的差异基因列表，通过分子对接技术初步筛选与
SINX
结合蛋白，然后进一步通过表面等离子体共振实验（
SPR
）、细胞热转移实验（
CETSA
）、
Bio-ATS pull-down
实验验证两者结合，再利用分子对接技术得出两者互作位点，构建结合位点突变体，看两者是否仍然结合。
（
2
）
SINX
的药效为何比
Sino
强？
SINX
是在
Sino
基础上改造，用于增强药效的。虽然文中也展示了
SINX
的药效确实比
Sino
强。但原因未解释清楚，是
SINX
比
Sino
更稳定？还是与靶点的结合亲和力更强？他俩的不同之处在哪，为何要这样修饰改造？
如果把以上两个问题讲清楚，这篇文章该发到更高水平的期刊上。
