为液体活检打好基础，从血浆中高效提取游离DNA

于是，游离核酸便成了当今医学研究的热点。在癌症研究中，它们是大有希望的靶标，可用于监控疾病进程、治疗效果或癌症复发。此外，与常用的组织活检等侵入性方法相比，游离核酸的分析通常还能实现更早期的诊断。这种分析也就是如今大热的液体活检。

在液体活检过程中，人们通常用EDTA采血管或专门的采血管进行采血。在血液中的细胞组分沉淀之后，取上清液来分离游离DNA（cfDNA）。接着，利用qPCR或毛细管电泳来定量cfDNA。之后，利用数字PCR、定量PCR或NGS技术等灵敏方法，人们可检测miRNA、单核苷酸变异或染色体突变。

当然，我们首先需要从血浆中高效分离游离DNA。这并不如想象中简单，因为血浆中游离DNA的量非常低，通常低于10 ng/mL。好在，市场上已经有了专门的试剂盒。比如，德国核酸提取专家MN就推出了NucleoSnap DNA Plasma kit。

这个试剂盒采用硅胶模技术，能够从1-10 mL血浆中高效提取游离DNA。试剂盒中的NucleoSnap DNA Plasma Column最多可处理5 mL血浆，并以非常小的体积洗脱（20-50 μL），带来高度浓缩的DNA。

整个操作过程也是大家熟悉的结合-洗涤-洗脱。首先，将血浆样品与蛋白酶K和结合缓冲液混合，并上样到硅胶柱上。之后应用真空抽滤，让DNA与硅胶模相结合。两步洗涤可有效去除污染物质，如PCR抑制剂。最后，利用洗脱缓冲液将高度纯化的DNA洗脱。整个过程大约需要45分钟。

至于游离DNA的产量，这要取决于供体的健康状况、血液的采集和处理、血浆制备等因素。相当一部分的游离DNA来源于凋亡细胞，因此，它们可能是高度片段化的。NucleoSnap DNA Plasma kit可分离片段大小在50-1000 bp的DNA，让你不错过任何关键的信息。

若实验室里的样品比较多，也可以选择高通量的试剂盒，比如NucleoSnap DNA Plasma Midi或NucleoSnap 96 DNA Plasma。怎么样？看着还不错。