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IHC/IF 如何做出发表级神图,从操作到重难点一次包会(送资料包)

生物学霸  · 公众号  · 生物  · 2024-12-02 17:32

正文

师妹

这周做了两次脑组织的免疫荧光,背景都很高,发愁。

大概率是洗涤不充分或封闭不充分导致的非特异性染色。要确保各步骤间用 PBS 至少洗涤 3 次,血清封闭效果一般的话,可以考虑加入 2~5% 的 BSA。

师姐

师妹

好的师姐!!

免疫染色相关的实验虽然操作简单基础,但细节很多,稍有不慎还是会白费功夫。

师姐


想要做好免疫组化实验,从样本制备到染色全过程,都有很多不可忽视的细节。不同类型样本如何做好固定?如何优化封闭过程减少非特异性结合?如何加强目标蛋白信号?如何选择合适的抗体进行多色免疫荧光?为更好地解决大家的困惑,赛默飞携手丁香园将于 2024 年 12 月 5 日 14:00 开展《聚焦 IHC/IF:从操作流程、优化策略到创新应用》线上讲座,本场直播会从基本原理、操作流程、疑难问题解析及窍门分享、应用案例拓展等内容展开详细讲解;无论是组织还是细胞样本,帮你成功通关 IHC/IF 实验!

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直播内容抢先看


1、免疫组化实验关键点深度解读

免疫组化实验主要包括样本制备,抗原修复、背景封闭、目标检测和结果分析与观察 5 步骤,每一步的疏忽都可能导致图像质量不高或者结果不准确等问题。我们整理了免疫组化实验每一步中不容忽视的注意事项,将为大家逐步讲解每个实验步骤中的关键点和常见问题解析


不同的样本类型如何确定合适的固定试剂?

热诱导抗原修复和蛋白酶诱导抗原修复你该如何选择?

如何优化你的背景封闭方案,减少非特异性结合?

如何选择合适的抗体进行染色

合理设置对照组和优化条件


2、高分进阶策略:如何做好多重免疫荧光染色

常规的免疫组化实验通常只能对组织中的一到两种抗原进行染色分析,展示和提供的信息比较有限。在直播中,我们将给大家介绍多重免疫荧光(三色、四色等)操作难点,不同荧光染料的选择原则,要考虑光谱兼容性、荧光强度和抗淬灭性等因素。如何设计多色免疫荧光实验方案,包括抗体组合、染色顺序和对照设置。相信看过之后你也可以做出 CNS 级别的多重荧光免疫组化结果图!


3、IHC/IF 实验经典研究案例解析

免疫组化在疾病诊断中的应用:我们将以乳腺癌高分研究为案例,介绍如何通过免疫组化标记 marker 蛋白,对肿瘤进行分型研究。

免疫组化中在细胞增殖检测中的应用:我们将为大家介绍最经典的细胞增殖标记物,以及如何根据信号表达分析组织内部细胞增殖情况。


通过本场直播,您不仅能一站式掌握免疫组化实验中重难点问题的解决方案,还可深入了解免疫组化实验如何助力高分研究的发表!点击下方海报马上报名,领实验资料大礼包及丰厚礼品


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IHC/IF 是科研人最常做的实验之一,多色荧光免疫组化更是迅速发展,成为高分研究的常客。但免疫染色背景高、目标信号弱,多色荧光抗体选择困难等问题也持续困扰着科研人。我们经过多年的研究,精心总结了 IHC/IF 的实验流程、难点解析、结果的影响因素以及操作优化方案等内容。资料包中还详细介绍了 IHC/IF 在类器官及空间组学中的应用案例,助您完成顶刊级别的研究内容。不论您是 IHC/IF 的新手,还是想要巩固知识的经验丰富的研究人员,都可以参考这份 IHC/IF 资料大礼包,以下是部分资料包内干货供您参考。


导致无染色或染色弱的常见原因及解决方案



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内容策划:王丹琦

内容审核:吴军

题图来源:赛默飞