前世，作为一个小细胞，我刚刚出生，来不及阻止，就被放进了一个长满杂菌的培养箱，杂菌抢走了食物，最终被饿死。
我重生了，这一世被一个细心的实验者照料。但是，因为培养箱过于拥挤，我被迫放在顶层，风吹日晒。杂乱的培养皿，风扇引起湍流扰乱了微大气环境，远处的杂菌细菌正虎视眈眈……
小细胞：哎，难道我们又要被污染了吗？
老细胞：没办法，虽然他们对我们精心照顾，但是培养箱的环境太过恶劣，我们活不下去的……
想要重生为细胞后混得风生水起？请先把细胞世界观背下来！这里总结了关于细胞污染的超全干货，文末还有以旧换新超级福利，一起来看看吧～
第一步 —— 观察培养基细胞状态
先看培养细胞的器皿有没有裂缝，如果有则污染几率非常大。
再看培养基颜色，正常情况下，培养基颜色是红色或者粉色，如果是橙色或黄色，则可能是污染或者细胞过密。
最后，观察培养基是否澄清，如果有少许漂浮物，则可能是污染或者有细胞凋亡，如果培养基很浑浊，甚至出现絮状物，则污染几率非常大。
图：肉眼可见浑浊有絮状物的培养基，细胞已被污染
第二步 —— 静置细胞 1～2 h，使用显微镜观察
菌类污染通常分为细菌、真菌霉菌和支原体，形态特征如下：
首先对所有可清洗的设备和容器进行清洁，以清除表面污垢或碎屑，接着使用高压灭菌器或化学消毒剂进行正确灭菌及消毒操作，玻璃器皿应倒置存放，塑料制品应存放在干净、干燥的地方。
在超净台内摆放过多的器材容易阻挡气道，还会阻碍紫外线对操作空间的灭菌。所以，超净台只摆放当次操作需要的用具，其余物品在操作结束后应及时取出。操作台面的物品应按照「新月形」布局进行调整（如下图）。
细胞培养瓶中的气泡可能导致培养基污染、细胞生长抑制、氧气供应不足、二氧化碳积累和细胞贴壁困难。进行细胞培养时，应定期检查培养瓶以监测气泡情况，并轻轻旋转或使用过滤器来减少气泡。
如果不取出承液盘而直接倒入蒸馏水，污染物依旧会残留。应该定期（每周 1～2 次）将承液盘整体移出并清空，然后用 70% 的酒精或异丙醇溶液擦拭消毒，待干燥后添加无菌蒸馏水，再放回培养箱内。
由于培养箱中高温高湿的环境非常适于微生物繁殖，且生长速度较快，长时间不进行箱体内部的清洁消毒会容易造成污染和交叉感染。因此，要对培养箱的内部腔体进行定期清洗、消毒操作。
建议使用 Eppendorf CellXpert C170 / C170i CO2 培养箱，其内部不含无法清洁的风扇以及相关 HEPA 过滤器，从而消除潜在的污染源。箱体内部配件少，拆装非常简便，易于清洁。同时还标配有高温消毒程序，便于用户自行进行高温消毒操作。
▲高温消毒
细心的小伙伴可能会担心，没有风扇怎么控制温度……CellXpert C170/C170i CO2 培养箱配备了多个独立的温度传感器，通过六面直热设计及加热元件的特定布置，能够实现腔体空气自然温和的对流循环，从而实现优异的温度和 CO2% 稳定性及均一性，并能在开门后能在 5 分钟内快速恢复温度和 CO2%。
细胞培养的每一个细节都可能影响实验的成败，所以 CO2 培养箱的设计工艺也在不断发展。我们特别推出了 Eppendorf CO2 培养箱以旧换新优惠活动，旨在为您提供稳定均一、安全无污染的细胞培养环境。
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内容策划：沈佳钰
内容审核：周育红
题图来源：视觉中国
