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国产正当时 | 临床治疗级γδT细胞培养方案加速通用型细胞治疗管线开发

医麦客  · 公众号  ·  · 2024-12-18 07:20

正文

质量为先 创新为本

Quality First   Innovation Based

γδT细胞生物学特征概述

γδT细胞是构成MHC非限制性的先天性T细胞群体,在先天免疫和适应性免疫之间架起桥梁。γδT细胞免疫治疗技术作为新兴的免疫疗法,以其独特的抗肿瘤优势成为新热点。γδT细胞主要通过分泌促凋亡分子和炎性细胞因子或通过TCR依赖性途径介导抗肿瘤治疗。多项临床研究数据表明,γδT细胞免疫治疗具有良好的耐受性和有效性。


γδT细胞占T细胞群体的0.5%~5%,主要存在于上皮和粘膜组织,比如皮肤、肠道等。γδT细胞抗原受体TCR是由γ链和δ链组成的异二聚体,γ链和δ链分别由γ基因和δ基因编码,每条肽链结构上可分为可变区(V区)、恒定区(C区)、跨膜区和胞质区,由可变区(V区)和恒定区(C区)共同编码,其中V区决定抗原特异性。


根据TCR的γ链和δ链的表达,γδT细胞分为三个亚型:Vδ1T细胞,Vδ2T细胞和Vδ3T细胞。各类细胞分布不同,作用也各有长短。

1)Vδ1T细胞亚群通常存在于胸腺和黏膜上皮组织中,约占γδT细胞10%-15%。

2)Vδ2T亚群集中于外周血,约占γδT细胞50%-90%,是最主要的γδT细胞。

3)Vδ3T亚群存在于肝脏组织中,仅占人体γδT细胞的0.2%。


抗肿瘤免疫治疗中的研究和应用

γδT细胞主要通过产生促凋亡因子和细胞因子或通过TCR依赖性等途径来调节抗肿瘤反应。在γδT细胞抗肿瘤治疗中,面临的主要障碍是γδT细胞在体外扩增数量少且没有成熟扩增方法。目前,最有效扩增γδT细胞的方法是利用磷酸化抗原或抗γδTCR抗体。 单纯使用化学药物唑来膦酸进行扩增,体外诱导扩增倍数和纯度低,动物和人体内的持续扩增能力也弱。


γδT细胞抗肿瘤的主要机制表现为:1、通过NK细胞受体直接杀伤肿瘤细胞。2、通过凋亡相关因子配体(TRAIL/FASL)诱导肿瘤细胞的凋亡。3、通过分泌的Granzyme/Perforin杀伤肿瘤细胞。4、通过ADCC效应杀伤肿瘤细胞。5、作为抗原递呈细胞,激活αβT细胞。6、促进DC细胞的成熟。7、促进B细胞产生抗体,提高体液免疫反应。8、通过表达的4-1BBL,激活NK细胞。


图片来源于网络


行业展望

γδT细胞的安全性和非MHC限制性,以及大量实验证明在癌症治疗过程中可以提供良好的预后和治疗价值。γδT细胞通过感应癌细胞特异性表达的应激信号,不靶向健康细胞,几乎无副作用,临床治疗拥有更广阔的应用前景。


运用临床成熟的,高效的,安全性高的体外扩增方法获得标准型的γδT细胞已经成为治疗恶性肿瘤的必经之路,进一步构建有效的、安全性高的γδT细胞体外扩增体系则是亟待解决的问题。 合佑生研发团队历经多年对细胞药物管线的理解,开发出高扩增、高纯度、高杀伤的γδT定向扩增试剂盒。


HiXpan ® γδT 扩增试剂盒产品简介


HiXpan ® γδT 扩增试剂盒产品优势:

  • 纯因子扩增

  • 以新鲜/冻存PBMC为起始细胞,定向扩增Vδ2细胞,扩增200-300倍,工艺可以线性放大

  • 扩增纯度超过90%,杀伤活性高,高表达CD56、NKG2D、HLA-DR

  • 体内有持续扩增能力


产品性能数据验证



显微镜下观察γδT细胞生长情况


扩增曲线                                 纯度数据

扩增倍数=细胞总数/初始PBMC数量


新鲜PBMC来源扩增γδT杀伤数据

PBMC来源扩增后γδT细胞在效靶比10:1,5:1,1:1,1:2时均能取得较好杀伤。


同Donor PBMC来源扩增

γδT新鲜冻存杀伤数据对比

γδT细胞冻存(使用合佑生无血清细胞冻存液冻存,货号; HYS01013 )复苏后比新鲜细胞的杀伤效果没有明显降低,依然能取得很好的杀伤效果。


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参考文献

[1]刘  义,王  慧,马春玲.γδ T细胞的生物学特征及在抗肿瘤免疫治疗中的研究进展[J].世界肿瘤研究, 2021, 11(3):8.DOI:10.12677/WJCR.2021.113011.

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