液相色谱柱的维护指南

一、日常使用注意事项

1. 流动相处理

• 使用前需过滤（0.22/0.45 μm滤膜）并脱气，避免颗粒物堵塞或气泡干扰。

• 含盐缓冲液流动相需现配现用，防止微生物滋生或盐析出。

• 避免长时间使用极端pH（常规反相柱pH 2-8），强酸/强碱流动相需选择专用柱。

• 样品需离心或过滤（0.22 μm滤膜），去除颗粒物和杂质。

• 避免直接进样高浓度强保留物质（如脂类、蛋白），可稀释或使用保护柱。

• 基质复杂的样品需要进行样品的萃取或富集。

• 安装保护柱（建议与分析柱填料一致），定期更换（通常每100-200次进样）。

• 在线过滤器可拦截颗粒物，需定期清洗或更换筛板。

• 流速避免超过柱耐受上限（参考柱说明书）。

• 柱温控制稳定，避免剧烈波动（如±2℃内）。

5. 色谱柱最好专柱专用，或者贴上标签（做一下使用记录）

二、清洗与再生方法

1. 反相色谱柱（C18/C8等）

• 常规清洗 ：
  先过渡至高水相（如95%水），以1 mL/min流速冲洗30分钟，再过渡至高有机相（如95%甲醇或乙腈）冲洗1小时。

• 强污染清洗 ：
  常规清洗后，再使用丙酮或异丙醇冲洗。

• 脂类污染 ：
  用四氢呋喃或二氯甲烷冲洗（需确认溶剂兼容性）。

• 用异丙醇冲洗，然后用甲醇冲洗，后用四氢呋喃或二氯甲烷过渡，再以正己烷或庚烷保存。

• 高盐污染：用低浓度缓冲液（如10 mM）冲洗，再过渡至纯水。

• 蛋白残留：0.1% TFA水溶液冲洗，或使用6 M尿素（需控制pH）。

• 使用高pH（>10）后：立即用中性流动相冲洗，避免硅胶骨架溶解。

• 使用低pH（<2）后：用高比例水相冲洗，避免盐结晶。

三、储存方法

1. 短期储存（<48小时） ：
用纯有机相（如甲醇/乙腈）充满柱子，两端密封。

2. 长期储存（>48小时） ：

• 反相柱 ：保存在100%甲醇或乙腈中。