揭秘纳米抗体制备第一阶段：羊驼免疫全流程实录（附高清视频）

抗体圈 · 公众号 · · 2025-02-17 08:34

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在纳米抗体的发现过程中，对羊驼进行免疫是至关重要的一步。专业的免疫操作流程确保了高质量的免疫反应，为后续的纳米抗体筛选和开发奠定基础。

康体生命特推出9800元/只羊驼免疫服务套餐，包含标准的羊驼免疫全流程，具体服务内容可参考以下步骤和要点：

抗原乳化

根据实验需求选择适当的抗原（蛋白、肽、多糖等），确保高纯度、高稳定性。免疫用的抗原一般为溶液和冻干粉两种形式。冻干粉加生理盐水或PBS后放室温30min充分溶解，在溶液中的抗原应使用新配制的灭菌生理盐水或PBS稀释。

可选择结合适当的抗原免疫佐剂，以增强免疫反应。抗原与佐剂需要等体积充分混合，制成稳定乳剂后用于羊驼免疫。抗原的乳化程度直接影响免疫效果，因此乳化后必须进行质量检查。

康体生命采用3小时以上涡旋振荡的方式制备抗原乳剂。抗原与弗氏佐剂乳化后性状形成油包水，康体生命抗原乳剂检查的方法是：室温下将制成的乳剂滴一滴在自来水表面，质量合格的乳剂滴入水面后应保持乳滴珠完整不分散。

免疫方案设计

实际操作中，免疫剂量、免疫部位以及免疫间隔时间的组合都会对免疫结果产生较大影响。针对羊驼，常用的免疫计量为每次注射500μg抗原，在颈部淋巴结附近多点注射。免疫周期通常设定为4-6次免疫，每次间隔14天。

可参考康体生命羊驼免疫周期表：

动物筛选与健康检查

选择健康的青壮年羊驼，确保无基础疾病。免疫用的羊驼最好选择2-3岁的年青成年动物，免疫系统发育成熟。特别要注意避免使用妊娠期的雌性动物用于制备免疫抗体。使用没有接受过免疫的个体，可获得更干净的抗体背景。由于对免疫应答的个别差异，免疫时可选用多只动物进行免疫。

免疫前，还应采血测定动物体内有无滴度交叉反应性天然抗体的存在。为确保动物在整个免疫进程中的健康状态，需要对羊驼来源，饲养环境需进行控制。

免疫注射 与采血

采用皮下或肌肉注射方式，每次注射后监测羊驼的健康状态，确保免疫过程安全无副作用。康体生命采用在每次免疫在颈部淋巴结附近左右两侧分两次注射的方式增强免疫效果。每次免疫后7-10天采血。

血清监测与免疫反应评估

4次免疫后通过ELISA等方法检测血清中特异性抗体的效价，判断羊驼是否产生足够的免疫应答。如果血清总IgG效价达到10E5，VHH抗体效价达到10E2，则可采血进行文库构建和筛选。如果没有达到，则需要根据免疫效价变化曲线判断是否需要加强免疫。

最终采血 和PBMC分离

在免疫结束后，进行大体积采血（通常50-200mL），通过Ficoll密度梯度离心法从血液中分离外周血单个核细胞（PBMC），经细胞计数保存在TRIzol试剂中，用于后续纳米抗体文库构建和筛选。健康的成年羊驼免疫后可分离得到的PMBC细胞数量一般不低于10E8/50ml羊驼外周血，通常来说足够用于纳米抗体文库构建和抗体序列筛选。

康体生命特推出羊驼免疫服务套餐，9800元/只羊驼起，包含专业的抗原乳化，4-6次免疫，采血，效价检测以及PBMC分离服务，并赠送纳米抗体文库构建和筛选方案。专业的免疫操作流程确保了高质量的免疫反应，为后续的纳米抗体筛选和开发奠定基础。

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揭秘纳米抗体制备第一阶段：羊驼免疫全流程实录（附高清视频）

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