mRNA免疫制备抗体：从跨膜蛋白到高效免疫应答的革新

外源 mRNA在体内表达蛋白的概念由来已久，其可行性可追溯到1990年。然而直到mRNA疫苗的获批以及诺奖的加持，才将该领域推向新的高度，促使科研团队或 公司积极探索mRNA在其它方面的应用，以期取得更大的突破。

mRNA免疫制备抗体是近年来的一项重要创新，得益于mRNA技术和单克隆技术的结合发展。这一技术平台的建立标志着抗体研究迈向下一个“新时代”，为药物开发提供更高效、更灵活的解决方案。

mRNA-LNP免疫方式，具有高表达率 、 强免疫应答 、 动物免疫周期短 等优势。 mRNA-LNP直接在宿主细胞内表达抗原， 无需体外蛋白表达。适用于难以体外表达的多次跨膜蛋白或构象敏感型抗原。一般 mRNA免疫制备抗体的技术路线如下图。

▲义翘神州 mRNA免疫制备抗体 技术路线示意图

1、 优化 mRNA设计

核苷酸修饰 ： Karikó等人发现，与未修饰的mRNA相比，核苷修饰的RNA免疫原性显著降低。如在mRNA中 添加 5 - 甲基胞嘧啶（ m5C）、6 - 甲基腺苷（ m6A）、5 - 甲基尿苷（ m5U）、2 - 硫尿苷（ s2U）或假尿苷（Ψ）等修饰核苷，可显著减少人树突状细胞分泌细胞因子，且修饰核苷含量与TNF - α表达的抑制程度直接相关。Karikó等人 还发现，在小鼠体内 修饰后的 RNA不仅安全性提高，翻译能力和mRNA稳定性也 会 增加。 目前 ， 1 - 甲基假尿苷（ m1Ψ）因其能显著降低 免疫 反应概率、提高疗效， 已 成为 m RNA 常用的 修饰方式 ，如 Moderna和辉瑞/BioNTech的疫苗均采用m1Ψ 修饰， 以增强表达并减少免疫系统的过度激活。

优化帽结构和 poly(A)尾长度 ： 帽结构与 poly(A)尾共同影响mRNA的翻译和稳定性。目前有多种合成帽结构用于增强体外转录mRNA的效率和安全性，如通过痘苗病毒加帽酶和 2′ O - 甲基转移酶添加帽结构 ，或在体外转录中进行共转录加帽等。帽与 poly(A)尾和RNA结合蛋白一起，决定着mRNA的环化，可确保全长翻译以及增强翻译效率。

优化 UTR ： 5′和3′非翻译区（UTRs）中的顺式调控元件影响mRNA的稳定性、定位和表达。富含GC的序列可减少二级结构形成，而引入已知高表达基因的UTR元件可提升蛋白产量 。 目前常用的治疗性 mRNA的UTR多来自α和β珠蛋白mRNA，也有研究通过筛选和构建文库来寻找更优的UTR序列。

优化编码序列 ： 通过用常用的同义密码子替换稀有密码子、增加 G:C含量、避免特定调控序列等方式，提高mRNA的蛋白质表达水平。

2、 选择高效递送系统

脂质纳米颗粒（ LNPs）是目前最有效的递送平台 ，不仅能保护 mRNA免于降解，还能 作为佐剂激活天然免疫信号通路（如干扰素通路），增强抗原呈递和适应性免疫应答。通过调整 LNP配方（如可电离脂质比例），可调控mRNA的靶向组织（如脾脏或淋巴结），提高抗体生成的效率。

mRNA-LNP技术通过整合高效抗原表达、精准递送系统和天然佐剂效应，在抗体开发的速度、效率和质量上均显著优于传统方法（如重组蛋白或灭活病毒疫苗）。其核心优势在于能够快速生成高亲和力、持久性的抗体，同时适用于复杂靶点，为抗感染治疗、肿瘤免疫等领域提供了革新性工具。