IL-2新作

IL-2是免疫学及免疫治疗的标志性分子，但尚未完全开发成功，努力依旧在继续...。

*2021年 Anaveon获得 Forbion， 诺华风险基金，和 Pfizer Ventures 等 1.1 亿瑞士法郎（约1.18亿美元）B轮融资。

最近 巴塞尔Anaveon和诺华发布了 ANV419（ IL-2/IL-2抗体融合蛋白）一些数据。

ANV419

ANV419 是一种独特的融合蛋白，由白细胞介素 - 2（IL-2）与一种抗白细胞介素 - 2 单克隆抗体融合而成，它在空间上阻断了 IL-2 与白细胞介素 - 2 受体（IL-2R）α 亚基的结合。因此，ANV419 通过存在于抗肿瘤细胞上的白细胞介素 - 2 受体 β/γ 亚基发出信号，但通过与毒性及抗肿瘤疗效降低相关的白细胞介素 - 2 受体 α/β/γ 亚基的信号传导则明显减弱。与 IL-2 相比，ANV419 的半衰期更长，对自然杀伤细胞（NK 细胞）和 CD8⁺ T 细胞的优先扩增表现出良好的选择性，并且在临床试验中具有良好的安全性。

实验方法

• pSTAT5 测定 ：在小鼠脾细胞和人外周血单个核细胞（PBMCs）中进行，通过检测 STAT5 磷酸化水平评估融合蛋白对不同细胞的刺激作用。

• NK 细胞受体表达分析 ：从健康志愿者 PBMCs 中分离 NK 细胞，用 ANV419 等刺激后，检测细胞表面受体表达变化。

• NK 细胞杀伤和抗体依赖的细胞介导的细胞毒性（ADCC）测定 ：将分离的 NK 细胞与肿瘤细胞共培养，加入 ANV419 或抗体，检测 NK 细胞杀伤能力。

• FcγR 单核苷酸多态性（SNP）分型 ：分析 PBMCs 中 FcγRIIIa 变体 158 V/F SNPs。

• 小鼠药效学实验 ：给小鼠注射化合物，检测血液中细胞变化。

• 同基因小鼠肿瘤模型疗效研究 ：在多种小鼠肿瘤模型中评估 ANV419 单独及与检查点抑制剂（CPI）联合使用的抗肿瘤效果。

• 肿瘤浸润淋巴细胞分析 ：从肿瘤组织中分离浸润淋巴细胞，通过流式细胞术分析细胞标记物表达。

• NCI - N87 异种移植小鼠肿瘤模型实验 ：在该模型中评估 ANV419 与曲妥珠单抗联合使用的效果。

• 食蟹猴毒理学研究 ：对食蟹猴进行不同剂量的 ANV419 注射，评估多种毒理学、药效学和药代动力学参数。

• 融合蛋白设计与优化 ： 将小鼠抗人 IL - 2 抗体 NARA118 人源化，通过多种方式生成并测试不同版本的抗体 - IL - 2 融合蛋白，包括结合亲和力测定、稳定性评估等，最终选择名为 ANV419 的融合蛋白进行进一步研究。

研究结果

• 细胞信号传导 ：在人 PBMCs 中，ANV419 对 CD8⁺T 细胞和 NK 细胞的刺激作用与 IL - 2 相似，但对 Tregs 的作用显著降低，选择性高达 1500 倍。

  
  

• NK 细胞激活 ：ANV419 刺激人 NK 细胞后，可增强其杀伤能力，且与 ADCC 诱导性抗体（如达雷妥尤单抗、曲妥珠单抗）联合使用时，能进一步提高其活性，尤其对 FcγR3a 低亲和力基因型的供体，可增强曲妥珠单抗的杀伤作用。

• 单独使用 ：在多种同基因小鼠肿瘤模型中，ANV419 单药治疗对部分肿瘤（如 H22 肝癌、Renca 肾细胞癌）有显著抑制作用，能增加肿瘤浸润的 CD8⁺T 细胞和 NK 细胞数量及其增殖能力，但对免疫原性低的 B16F10 黑色素瘤模型效果有限。

• 联合使用 ：与 PD - 1 或 CTLA - 4 检查点抑制剂联合使用时，在 H22 肝癌模型中显示出相加的肿瘤生长抑制效果；在 NCI - N87 异种移植小鼠肿瘤模型中，与曲妥珠单抗联合使用也能增强肿瘤生长抑制作用。

• ANV419 的药代动力学和安全性 ：在食蟹猴中的研究显示，ANV419 的半衰期约为 24 小时，每两周给药一次可使循环中的 CD8⁺T 细胞和 NK 细胞持续增殖，且未观察到高剂量 IL - 2 常见的严重毒性（如毛细血管渗漏综合征），仅诱导轻度剂量依赖性全身炎症反应，表现为抗炎因子（IL - 1Ra、IL - 10）上调和炎症血清标志物（CRP）短暂升高，以及血小板计数短暂减少。