寡核苷酸的色谱分析方法总结

色谱 · 公众号 · · 2024-12-15 19:10

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寡核苷酸：由100个以内的核糖核苷酸或脱氧核糖核苷酸单链或双链组成的核苷酸，也称为寡核苷酸药物。寡核苷酸药物主要是通过碱基互补配对原则与DNA、mRNA或者pre-mRNA配对，通过基因沉默、非编码RNA抑制、基因激活等一系列机制来调节基因表达。

寡核苷酸的色谱分离方法目前已经比较成熟：①反相离子对色谱法；②阴离子交换色谱法；③HILIC色谱法

1. 反相离子对色谱（IP-RP）

寡核苷酸属于酸性强极性化合物，在一般反相色谱柱上很难保留。所以我们需要加入离子对试剂来进行离子对反相色谱分析。寡核苷酸分析常用的离子对试剂主要有醋酸-三乙胺（TEAA）、碳酸-三乙胺（TEAB）、六氟异丙醇（HFIP）-三乙胺

案例1，寡核苷酸n和n+1的分离，C18色谱柱，3um，4.6*150mm，流动相：100mM TEAA水溶液（pH7.0）和甲醇

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