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文献里那些一脸懵逼的图:转录因子

实验万事屋  · 公众号  · 科研  · 2017-05-02 08:30

正文

过完节了,要回到实验室了,当然,说不定,你都没出过实验室。


看文献的时候,很容易遇到一些你可能觉得比较怪的图,总是会一脸懵逼。


没关系,等你看多了文献…………自然就会习惯这种懵逼了。比如下面这种图:



这种图一般是出现在转录因子研究的文献中的ChIP-Seq图,那首先我们要看,啥是转录因子呢?



转录因子就是能结合在基因的启动子区域,可以启动基因表达,或者操纵基因表达,或者,应该有的可能会堵在前面阻碍基因表达的。



当然,在序列上转录因子不光会结合启动子区,还会结合在Enhancer,也就是促进子之类的元件上。



说简单点,就是转录因子,就是一种能结合在DNA上的蛋白。



于是就产生了这样的技术,用抗体固定在大珠子上,然后把转录因子的蛋白质沉淀下来。沉淀的过程中,把染色质的DNA消化成片段,这样就能顺带着转录因子,把它结合的DNA序列拉下来了,这个就是ChIP,染色质免疫共沉淀。



由于被拉下来的片段,即使是同一个区域,也有长有短。



所以会把这需要分析的片段上的蛋白先洗脱下来,然后去测序。测序结果会被拼回到染色体的基因组DNA序列上,这样,拼回去次数越多的片段,就会显示信号读值越高。自然结合这个转录因子的序列,在ChIP过程中会被拉下来更多,读值就会越高,不结合的话,ChIP就拉不下来,也不会有读值。



那问题来了,为啥这个图上还有负值呢?呃,那当然是结合在反义链上的咯~一般来说,文献中的这类ChIP-Seq图,就是可能也就是为了说明这么几种内容:


1)这转录因子能结合这基因启动子区

2)经过处理后转录因子结合能力变差

3)两种转录因子同时能结合在同一片段上,可能这俩有一腿


当然ChIP-Seq还会通过分析这个转录因子结合的最高的频次的基因序列,分析出大概的结合位点,就像这样:



这些都在JASPAR上可以查到,当然JASPAR也能分析序列。


…华丽丽的分割线…




李莫愁博士:转录因子的图能看懂了么?一般来说,转录因子研究的文献中大多都有类似这样的图。看懂了就能一眼扫过大概明白是什么意思了。好了,今天就先策到这里吧。




延伸阅读:

我如何qPCR数据分析? 

穷逼实验室的实验技巧