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Q40实测数据亮眼,DNBSEQ平台全面助力WGS、单细胞和微生物等多个领域研究!

基因谷  · 公众号  ·  · 2024-03-06 17:37

正文

近日,华大智造发布了新一代StandardMPS 2.0(简称SM 2.0)测序试剂, 该产品不仅使得测序数据的产量和Q30等参数均获得有效提升,而且使DNBSEQ平台的测序质量达到了Q40(>85%)。

StandardMPS 2.0测序试剂的发布,将开启基因测序行业测序质量达Q40的时代,可为全球用户带来全新的产品体验。本文总结了SM 2.0测序试剂搭配不同DNBSEQ测序平台得到的测试结果,并涵盖两家早期用户基于SM 2.0的实测表现。 数据显示,华大智造StandardMPS 2.0测序试剂可使得DNBSEQ测序平台中>85%的碱基测序质量达Q40, 全基因组测序(Whole Genome Sequencing,WGS)、单细胞以及微生物研究均可受益于测序数据质量的提升。

StandardMPS 2.0如何实现Q40?

DNA 聚合酶和MDA 酶优化

经过不断地筛选与测试,采用了具有更高聚合效率的DNA 聚合酶以及拥有更好二链置换功能的 MDA(多重置换扩增)酶。


dNTP 优化

通过优化dNTP上的荧光染料,降低碱基之间的crosstalk, 从而提升碱基识别的准确度。


Q值表优化

利用高保真酶和PCR-Free建库方法,降低上游实验引入的错误,用更准确的模型训练,提高数据的解读精度,生成更精确的Q值表。


多平台适配

StandardMPS 2.0适配多款测序仪(DNBSEQ-G99,MGISEQ-2000,DNBSEQ-T7等)以满足用户不同的应用场景需求。



测序质量达到Q40意味着什么?
测序质量达到Q40代表碱基识别准确度达到了99.99%级别 1 ,从Q30 (99.9%)的碱基识别质量跃升至新的高度。 测序质量达到Q40将为科学研究和临床应用等提供更多可能:如更准确地检测低丰度碱基,进而促进肿瘤学研究中的低频突变 2 、传染病研究中的低频耐药突变 3 、液体活检中的新型生物标志物如ctDNA 4, 5 的发现。同时,测序质量达到Q40也有助于WGS研究中的SNP(单核苷酸多态性)及InDel  (插入 / 缺失)等变异的发现 6 ,提高细菌等微生物的鉴定准确度 7 等。


实测数据: 可促进WGS、单细胞及微生物等研究

数据来源:华大智造内测

测序平台:DNBSEQ-G99, MGISEQ-2000, DNBSEQ-T7

应用方向:WGS,肿瘤检测


测序质量获得极大提升

SM 2.0搭配不同DNBSEQ平台(DNBSEQ-G99, MGISEQ-2000以及DNBSEQ-T7)Q40超过85%。Total reads数,Q30及其他测序数据参数相较于上一代试剂SM均有提高(表1),测序质量达Q40的碱基比例显著增加(图1)。
表1. SM 2.0可显著提高DNBSEQ测序平台的数据质量。 注: ESR(%): Effective Spot Rate,ESR=(Total Reads / DNB Numbe r)×100%; 以上文库均为 E. coli 文库。
图1. SM 2.0显著提升DNBSEQ平台测序数据质量。 SM或SM 2.0搭配DNBSEQ-G99(A)、MGISEQ-2000(B)或DNBSEQ-T7(C)得到的不同Q值下的碱基比例分布; SM 2.0搭配MGISEQ-2000(D)或DNBSEQ-T7(E)所获测序数据质量与其他厂商测序平台的比较分析。 其中A为 E. coli 文库,B-E均为NA12878文库。

有效提高WGS研究中的变异检测效率

SM 2.0搭配MGISEQ-2000对SNP和InDel检测的准确度超过行业同类平台,分别达到了99.8%和99%(图2A)。测序质量的提升亦降低了对数据量的需求,达到30×平均测序深度所需的原始数据量显著低于120 Gb的行业标准以及行业同类平台所需数据量(图2B)。

图2. SM 2.0搭载DNBSEQ测序平台可极大提高WGS研究中的SNP/InDel检测精度,并降低所需测序数据量。 以上测序文库均为NA12878文库。

数据来源:Xpress genomics

测序平台:MGISEQ-2000

应用方向:单细胞RNA测序 (scRNA-seq)


加速单细胞测序的应用拓展
在单细胞测序场景下, 相较于上一代测序试剂SM,SM 2.0搭配MGISEQ-2000使测序质量达Q40的碱基比例高达90.88%。 得到的高质量reads (Total Read s)更多,比对率(Mapping rate)更高,错误率(Mismatch rate)更低,对特异等位基因表达水平的检测更为准确。
Xpress Genomics公司首席执行官Christoph Ziegenhain表示 :“我们对StandardMPS 2.0测序试剂的发布感到激动,它能够将测序质量提升到Q40。它的早期测试数据表现非常出色,这有助于我们拓展单细胞测序的应用。”
数据来源:Ambiogen

测序平台:DNBSEQ-T7

应用方向:微生物研究,宏基因组测序


强效助力微生物领域研究

在微生物研究领域,SM 2.0搭配DNBSEQ-T7可使Q40高达90.75%,Q30亦提升至94.22%。

Ambiogen公司首席执行官Maike Seifert表示 :“在宏基因组测序的早期测试中,StandardMPS 2.0试剂表现出卓越的Q40测序质量。它让测序数据具有很高的准确性和可靠性,能够帮助我们对复杂微生物群落进行更精确的分析和研究。”

结 语
以上实测数据表明,华大智造StandardMPS 2.0测序试剂可使得DNBSEQ测序平台中>85%的碱基测序质量达Q40,WGS、单细胞以及微生物研究均可受益于测序数据质量的提升。 StandardMPS 2.0测序试剂搭配DNBSEQ平台测序可进一步提升测序质量,降低测序成本,这对于深入解析生物体内错综复杂的生物学过程至关重要,将极大地推动高通量测序技术在肿瘤学研究、传染病领域、遗传病诊断等领域的广泛应用。






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