利用液相色谱分析一个样品,我们要在软件上
建立一个分析方法
,然后保存这个方法,换好流动相,平衡好色谱柱后,
再
运行这个方法
即可得到我们要的数据。
一、建立分析方法
方法建立的途径:① 可以调用已有的方法进行修改,然后再另存。② 也可以新建一个新的空白方法,再保存。③ 还可以通过编辑完整方法来创建新方法(可以在运行样品时,从脱机软件上进行完整方法编辑并保存)。
开启联机工作站, 点击“方法和运行控制”
,我们看到进样器、泵、TCC(柱温箱)、DAD(检测器)四个模块。
我们看到联机后有的模块状态显示黄色(未就绪)
,可以点击右下方的“打开”键
,启动各个模块。
1.泵设置
置换所用通道的流动相:把各通道吸液管路放进准备好的流动相中,逆时针旋开泵模块上的溶液排空阀
。
右键单击泵模块的空白处,选择“方法”,设置“流速”为
4
ml/min,分别将用到的各通道设置成100%进行置换,每个通道置换2~4min。
流动相换好后
,顺时针旋紧排空阀
,
连接好色谱柱,设置好流速和
初始流动相比例
,进行色谱柱平衡。
平衡色谱柱的同时,我们可以继续设置相应的参数,各通道流动相的名称、
每一针的时长、
梯度设置。
2.进样器设置
右键单击进样器模块的空白处,选择“方法”,设置进样量、进样方式(标准进样/洗针后进样)。
3.柱温箱设置
右键单击TCC
模块的空白处,选择“方法”,设置左侧和右侧温度,需要低温的话,
只能冷却到比环境温度低 10 ℃的温度。
4.检测器的设置
右键单击DAD
模块的空白处,选择“方法”,①勾选并设置一或多个波长;②
如果需要全波长的光谱数据,那么选择存储“全部”,③并
设置
波长扫描范围
。④开启紫外光灯或可见光灯。
设置好以上参数后,点击菜单栏的“方法”,另存方法并命名。
如果在运行方法过程要建立新方法,在脱机工作站中编辑完整方法:点击“方法和运行控制”
,菜单栏“方法”下“编辑完整方法”,根据向导设置各个模块的参数,最后保存即可。
二、运行方法或运行序列。
1.运行方法(单针进样)
点击菜单栏“运行控制”,如果样品信息和存储路径已设置好,那直接点击“运行方法”即可。
如果没设置好,
点击
“
样品信息”
,设置数据
存储路径、样品瓶位置
和
样品名称等信息。
最后点击“运行方法”即可。
2.运行序列(多针进样)