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选购指南:细胞分选仪大比拼

生物通  · 公众号  ·  · 2017-07-10 11:27

正文

Stacy Blain是SUNY Downstate医学中心的细胞生物学助理教授,她的团队一直对细胞分选感到头疼。之后这个团队购买了一台高度自动化的小型细胞分选仪,先前的问题终于迎刃而解。

荧光激活的细胞分选仪一般都比较笨重,而且需要仪器中心的专业人士进行操作。不过,近年来市面上出现了新一代的细胞分选仪,这些小型细胞分选仪的价格更加亲民,而且研究者们只需要接受短期培训就可以自己进行操作。


当然,传统的大型细胞分选仪速度更快,而且能处理更多的颜色,“但我们并不需要那么多颜色,”Blain说。“四种颜色就足够了,而且小型细胞分选仪也挺快的。”一些大型仪器中心也对简化了的小型细胞分选仪感兴趣,它们“能为大型分选仪分担许多工作,”Emory大学儿科流式检测中心的技术主管Aaron Rae说。


目前,越来越多的人开始利用GFP对细胞进行分选。举例来说,通过CRISPR建立敲除细胞系的研究者们,开始给核酸酶标记GFP,以便分选出改造成功的细胞。


从安全方面来看,小型细胞分选仪也很有优势。含有细胞的雾化液滴可能会破坏操作人员的身体健康,而小型细胞分选仪可以放到标准的生物安全柜里,另外你也可以购买特制的容纳装置。当然,大型细胞分选仪也有类似的安全装置,但价格要昂贵得多,而且“跟房子差不多大,”Rae说。


The Scientist》杂志撰文介绍了市面上几款常见的小型细胞分选仪,从性能、价格等多个方面比较了它们的优劣。

                               

SONY SH800

生产家用电子产品的索尼公司2010年开始涉足细胞分选领域,它收购了流式细胞公司iCyt2012年,索尼生物技术在北美发布了SH800细胞分选仪。

 


优点

  1. Bio-RadS3一样,SH800自动化的激光器调整、液滴延迟计算等性能广受好评。“我现在只需要给其他人培训半小时,他们基本上就会使用了,”Johns Hopkins大学的博士后Peter Andersen说,他负责操作实验室里的SH800。此外,细胞分选仪开始运作之后,用户是可以走开的。

  2. SH800的软件也备受赞誉。“我差不多五分钟就会用了,”Emory大学的Rae说。他最近试用过这台仪器,正在考虑给仪器中心添置一台。

  3. 与绝大多数细胞分选仪不同的是,SH800使用一次性的塑料微流体芯片进行细胞分选,而不是用陶瓷喷嘴。小型细胞分选仪的陶瓷喷嘴往往只有一个尺寸,而SH800提供不同导管直径的分选芯片,Sony 公司的Deena Soni介绍道。分选肿瘤细胞时可以使用较大孔径和较慢流速,分选酵母的时候可以用较小孔径进行更快的分选。


缺点

有些用户并不喜欢这种一次性芯片,价值35美元的芯片只用一次就扔掉,总感觉有点浪费。


BD FACSJazz

BD公司20126月发布的FACSJazzBD Influx的精简版,为了简化操作这款仪器固定了一些变量,比如喷嘴尺寸和鞘液压力。

 


优点

  1. 用过BD Influx的老手对FACSJazz一定也不陌生,对于有经验的人来说它将是个很有吸引力的选择。

  2. FACSJazz的液流系统很容易拆卸和替换,便于清洗。这一点对于Adams来说最有吸引力,因为他的仪器中心常常需要分选有害物质,比如肺结核、脑炎细胞以及HIV阳性血样。从这个方面来看,FACSJazz特别适合那些分选细胞用于人体的研究者。


缺点

与市面上其他小型低成本细胞分选仪(比如S3/S3eSH800)相比,FACSJazz的自动化程度还不够高。举例来说,FACSJazz用户需要自己调整激光器和计算液滴延迟时间。费城儿童医院仪器中心的Florin Tuluc去年五月份购买了一台FACSJazz,“你需要守在这台细胞分选仪旁,”他指出。在西班牙Achucarro Basque神经科学中心操作这台仪器的Laura Escobar说:“这款仪器不适合完全没有流式经验的人。”


BIO-RAD S3/S3E

Bio-Rad S3其实就是Propel Labs开发的Avalon分选仪,Bio-Rad在该产品发布之前将其买来,重命名为S320149月,Bio-Rad又发布了新版细胞分选仪S3e,每天仪器启动的时候或者拿出来清洗之后S3e的喷嘴会自动重排。

 


优点

  1. 对于没什么经验的使用者来说S3是很容易上手的,芝加哥大学流式检测中心的技术主管Ryan Duggan说。当然,你应当对流式细胞分析有基础性的理解,还要接受一点仪器操作的培训。传统的细胞分选需要使用者进行复杂的设置和调整,比如调整激光器。但S3不需要这些步骤,能够自动为细胞分选做准备。

  2. S3直观而且人性化的软件得到了用户的高度评价.

  3. 与许多细胞分选仪不同的是,提供鞘液的系统位于仪器内部,不需要笨重的外部装置(fluidics cart


缺点

  1. 尽管容易使用,但“S3的颜色很有限,”密歇根大学BRCF流式检测中心的管理人员Dave Adams说(他选择了不那么自动化的FACSJazz细胞分选仪)。S3/S3e只能检测四色荧光,而有些细胞分选仪能检测6-8种颜色。

  2. S3/S3e可以分选到试管和8孔条,但不支持96孔板


CELLECTOR SCINDO XT

Scindo XT的前身是Bay BioscienceJSAN JrSwift细胞分选仪。Cellector公司最近收购了Bay Bioscience细胞分选技术的知识产权,并正式推出了Scindo XT


优点

  1. Scindo XT能自动调整激光器和计算液滴延迟。


缺点

JSAN JrSwift刚面世不久,用的人还不多,它的强大性能还有待时间的检验。


近来,越来越多的研究者需要对表达GFP的细胞进行分选。为此,Cytonome公司特别开发了专门用于GFP细胞分选的仪器,Cytonome Viva

优点

  1. Viva分选仪的售价不超过九万美元,是目前价格最低的细胞分选仪,Cytonome公司的副总裁Ruud Hulspas介绍道。

  2. 这款仪器专门为GFP分选进行了优化,就算你没有细胞分选经验也很容易上手,不需要调整设置Viva就可以自动分选细胞。

  3. Viva的整个液流系统位于分选仪核心,不需要额外的空间。它还内置了一个平板界面,不需要连接电脑显示器。


缺点

  1. Viva目前只能进行一种颜色的细胞分选。Cytonome公司正在开发新版仪器,将GFP分选与其他报告基因结合起来,比如mCherry

  2. Viva不能分选到微孔板中。

  3. 这款仪器还需要经历市场的检验。



常见小型细胞分选仪参数对比  

型号

售价(国外)

尺寸(in

激光器

颜色

样本规格

Bio-Rad S3/S3e

$120,000–$160,000

28 x 26 x 26 加电脑显示屏

最多2个激光器(标配488nm,可添加561640nm)

最多4色荧光

1.55ml管、8孔条、载玻片

BD FACSJazz

2激光6$240,0003激光6$273,000

21 x 20 x 20加电脑显示屏和fluidics cart

最多3个激光器(标配488nm,可添加405561640nm)

最多6色荧光

515ml管、载玻片、多至384孔板

Scindo XT

$100,000–$140,000

28 x 27 x 25加电脑显示屏和fluidics cart

最多2个激光器(标配488nm,可添加638375405561nm)

最多8色荧光

5ml管、载玻片、8孔条、多至384孔板

Cytonome Viva

< $90,000

26 x 16 x 19

1个激光器(标配488nm)

专门分选GFP细胞

1.551550ml