生化结果为什么会出现负值？出现负值了怎么办？

来源： 检验视界网 作者： 燕子李三

生化项目负值的结果是怎么来的，为什么会出现负值。

在一个月黑风高，凌晨两点的夜晚，忙得不可开交的你，正准备审核完最后一个生化报告去休息室打个盹。然而，当你看到高大上的生化仪传过来的结果时，砸仪器的心都有了。什么鬼？负值！于是，你不得不打起精神，重做一次。运气好的话，半个小时能把报告发出去，运气不好的话，嘿嘿嘿…… 那么，这个负值到底是怎么来的呢？

下面，我来试着解释下生化项目负值的结果是怎么来的，为什么会出现负值。

上图是两点终点法的浓度计算公式，其中定标液1一般是0浓度，斜率和截距仪器默认一般是1和0（参数设置界面有可能做过更改，不是1和0）。那么负值就自然就来自于前半部分的K(A _x -A _b )。

1. A _b ：即S1 Abs，就是我们通常说的试剂空白，不管是常规标本，定标还是质控测试的结果都会减去试剂空白。

2. A _x ：也就是参数界面设置的两点间吸光度的差值，具体计算方式如下图（注意并不是简单的将两点的吸光度相减，并且考虑了加入R ₂ 之后的稀释效应）：

3.K ：我们一般说的K值或K因数，定标之后得到或者手动输入的，计算公式如下图：

其中A ₂ 的计算方式与上面提到的 A _x 相同，S1 Abs即试剂空白。

以上三者都可能是负数，都与吸光度有关，所以凡是会造成吸光度不正常变化的因数都有可能造成负值的结果。

1.灯泡老化或质量问题： 日立7180是要求吸光度>19000或750小时需要更换。

2.反应杯脏或者损坏： 日立7180是要求与1号反应杯的吸光度差值＜±800。

3.清洗针堵塞或者漏气： 反应液无法抽走或者无法添加清洗液进行清洗；也有的可能会在测试中滴水，反应液被稀释，造成吸光度突然下降，可能出现负值。

4.搅拌棒清洗不干净： 搅拌棒有一层特氟龙涂层，如果被刮坏，不易洗干净，易造成交叉污染。

5.样品针堵塞： 样品没有被加入到反应杯，没有发生反应，反应曲线是一条直线，吸光度没有变化，差值为负，出现负值。

6.试剂R1/R2添加错误： 很多实验室应该都是习惯于在试剂快用完了时，往试剂瓶里面添加试剂的做法，日立加样顺序是：样本S+试剂R1+试剂R2，因为主要反应物在R2，如果放反了，样本S和试剂R2直接就开始反应，吸光度上升，等试剂R1加入后吸光度下降，吸光度差值为负，结果出现负值。

7.严重脂血或黄疸标本： 加入样品S+R1时吸光度就很高，加入R2之后反应的吸光度可能还没有S+R1高，吸光度差值为负，结果出现负值。