实验小白 western Blot 必修手册

蛋白质免疫印迹（Western Blot ）作为最基础分子实验，是每一位实验小白必修技能。western Blot有以下范围应用：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。

下面小编供上的是Abcam经典Western Blot protocol，包括样品准备、凝胶电泳、凝胶到膜的转移以及检测蛋白的免疫染色，帮助初学者简单明了的get 到你所做的western 是怎样的 western。

Western Blot操作步骤多，每一步的失误都会造成全盘失败，综合而言，抗体仍然是决定成败的关键。其中内参抗体很重要，因为内参抗体的选择关系到全盘实验的考评。Actin，Tubulin，GAPDH都为最常用的内参抗体，Actin，Tubulin的缺点是有时候会出现复带，GAPDH与前两者相比比较稳定 ，建 议选择。实验顺顺利利 的前提是 注意每一个环节，步步为营 ， 祝君顺利！

WB 的基本套路

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