通知要点：
由实验操作大牛主讲的 CRISPR/Cas9基因编辑技术专题学习班将于 4月22～23日在北京冠京饭店举办，现报名中，报名方法见文末。本次学习班将深入系统的讲解基因编辑知识，同时讲解实验操作容易遇到的问题及注意事项、解决方法。学员与老师同时组建微信群深入交流探讨，帮助解决后续实验过程中遇到的技术及理论问题。可提前准备好自己科研中遇到的问题。
开展背景
基因编辑技术指能够让人类对多个物种内的目标基因进行“精确编辑”，实现对特定 DNA 片段的删除、插入、定点突变等。与传统的 TALEN 和 ZFN 基因编辑技术相比，CRISPR/Cas9技术自问世以来，以其操作的便捷性，高效的基因编辑能力获得青睐，成为当下科研工作者的新宠儿。目前该技术已广泛应用于人、大鼠、小鼠、斑马鱼、果蝇、猪、水稻、小麦和拟南芥等动植物（细胞）以及细菌等微生物的基因组靶向改造，并已在功能基因组研究、疾病防治、动植物育种、动物疾病模型开发、基因治疗等领域展现出巨大的应用前景。
大量从事医学和生命科学的研究者，都将会在自身的研究领域中用到 CRISPR/Cas9基因编辑技术，但在实际操作中，由于各种原因常常遭遇技术瓶颈，因而无法顺利地达成实验目标。为此，特于4月22日-23日在北京举办以 CRISPR/Cas9为主要内容的基因靶向修饰技术专题学习班。
本次学习班将深入系统的讲解基因编辑知识，同时讲解实验操作容易遇到的问题及注意事项、解决方法。学员与老师同时组建微信群深入交流探讨，帮助解决后续实验过程中遇到的技术及理论问题。可提前准备好自己科研中遇到的问题，通过现场及后续的交流探讨，全面掌握 CRISPR/Cas9技术应用的方法及技巧，避开科研路上的弯路和陷阱，轻松成为科研达人。
主办单位
莫速乎科研教育（上海莫速乎教育投资有限公司）
上海荆麦信息科技中心
主讲专家
主讲专家来自中国农业科学院，先后参与并承担973、863、国家自然基金课题及转基因重大专项课题。研究领域为基因组编辑、体细胞核移植、疾病模型的建立以及胚胎发育过程中表观遗传学研究等。有丰富的理论和实际研究经验。学员通过与专家直接交流，能够分享到这些顶尖学术机构的研究经验和实验设计的思路。学员通过集中专题学习后能够扩展思路，在研究技术方面领悟更多。
课程安排：（具体课程进度根据实际反馈情况进行适当调整）
第一天上午8:30-11:30
一、基因编辑技术
1、基因打靶技术
2、细胞基因组 DNA 的修复机制
3、基因敲除与基因敲入
4、ZFNs、TALENs 技术
二、CRISPR/Cas9基因组编辑技术原理
1、CRISPR/Cas系统
1.1、CRISPR/Cas系统的发现
1.2、CRISPR/Cas系统的组成
1.3、CRISPR/Cas系统的工作原理
2、CRISPR/Cas9技术的发展及其应用
2.1 CRISPR/Cas9技术的建立
2.2 CRISPR/Cas9技术的应用
2.3 CRISPR/Cas9技术的脱靶问题
第一天下午13:30-17:00
三、CRISPR（sgRNA）的设计与制备
1、目标基因结构及功能的生物信息学分析
2、gRNA 的设计（在线互动设计演练）
3、sgRNA 模板的制备
4、sgRNA 表达载体的构建
4.1 sgRNA 的体外表达
4.2 sgRNA 在哺乳动物细胞中的表达
5. 以上内容相关实验的注意事项、实验技巧、实验结果讲解
四、Cas9的选择与制备
1、Cas9的选择
1.1 Cas9蛋白的结构特点简介
1.2 Cas9的密码子优化
2、Cas9表达载体的构建
2.1 Cas9的体外表达
2.2 Cas9在脊椎动物细胞中的表达
3、以上内容相关实验的注意事项、实验技巧、实验结果讲解
第二天上午8:30-11:30
五、sgRNA 活性验证
1、Indel 突变检测的基本策略
2、基于细胞系活性验证方法
2.1 PCR 产物酶切检测及利用 ImageJ 软件计算活性。
2.2 PCR 产物亚克隆测序法
3、基于胚胎的活性验证方法
4、以上内容相关实验的注意事项、实验技巧、实验结果讲解
六、利用 CRISPR/Cas9技术创建基因组编辑人及动物细胞系
1、目标基因的基因组组成分析
2、基因组编辑策略设计
2.1基因敲除
2.2基因敲入
2.3定点突变
2.4大片段删除
3、sgRNA 的设计与活性验证
4、用于基因敲入的供体 DNA 的设计
4.1 ssODN（单链 DNA 供体）
4.2 双链 DNA 供体
5、质粒（和/或供体）导入细胞系的方法（脂质体转染，电转，病毒转导）
6、阳性克隆筛选
6.1目标基因组 DNA 片段的 PCR 扩增
6.2PCR 产物酶切检测
6.3PCR 产物亚克隆测序
7、基因组编辑细胞系的建立
8、提高基因敲入（同源重组）效率的策略
9、以上内容相关实验的注意事项、实验技巧、实验结果讲解
第二天下午13:30-17:00
七、利用 CRISPR 技术创建基因组编辑动物
1、目标基因的基因组组成分析
2、基因组编辑策略的选择
2.1基因敲除
2.2基因敲入
2.3定点突变
2.4大片段删除
3、sgRNA 的设计与活性验证
4、用于基因敲入的供体 DNA 的设计
4.1 ssODN（单链 DNA 供体）
4.2 双链 DNA 供体
5、通过显微注射法向受精卵中导入sgRNA/Cas9 mRNA/供体 DNA
6、胚胎中基因编辑效率的检测
6.1 单细胞 PCR 扩增
6.2 PCR 产物测序验证
7、胚胎移植，获得基因编辑个体
8、基因编辑动物 F1代的鉴定
9、通过体细胞克隆法获得基因编辑动物
9.1 供体细胞分离、培养
9.2 供体细胞的基因编辑
9.3 体细胞核移植操作
9.4 胚胎移植
9.5 基因编辑个体的鉴定和扩繁
八、基因组编辑技术的脱靶问题
1、脱靶的产生原因
2、脱靶检测方法
3、如何解决脱靶问题？
4、脱靶问题对不同领域研究者的意义
九、CRISPRi 基因表达抑制技术以及 CRISPRa 基因表达激活技术
1、dCas9的特征简介
2、运用 CRISPR 技术调控基因在细胞中表达的基本实验过程
3、CRISPR 技术介导的转录抑制（CRISPRi）
4、CRISPR 技术介导的转录活化（CRISPRa）
十、基因组编辑技术的前景展望
1、基因组编辑技术对未来社会的革命性影响
1.1 功能基因组研究（功能获得性研究、功能缺失性研究）
1.2优良经济性状动植物新品种的选育
1.3人类疾病的动物模型的建立
1.4 基因治疗
2、基因组编辑技术的伦理学问题
具 体 事 项
研讨会时间地点
北京：北京冠京饭店
北京市丰台区丰台北路79号(近丰体南路)，地铁9号线七里庄站A2口出
2017年4月22日～23日（21日下午报到）
参会对象
从事生物、医学、理工、农业等各科研专业，需要发表SCI文章的科研工作者及硕士、博士研究生，年资不限，各有收获。
注册费用
2400元/人，三人以上团体2200元/人
按缴费先后顺序确定座次；注册费含会场、专家讲课费、教材、午餐、税费。不含住宿费。
缴费账号
开户行：中国建设银行（上海市泗泾支行）
户名：上海荆麦信息科技中心
银行账号：3100 1983 0100 5002 2781
备注写明：姓名+基因编辑 以便于查询
少数单位转账时需提供我方开户银行行号：1052 9008 0036
如通过支付宝转账须支付到：（支付宝无法转账到企业银行，只能转账到企业支付宝）
企业支付宝：[email protected]
户名：上海莫速乎教育投资有限公司
缴费后请将汇款凭据截图或拍照，并发送邮件到[email protected]告知详情以备核实。如多付款我们将会退还给您，敬请放心。经盖章的纸质版邀请函将会与发票一起在会议第二天下午统一发放给大家。目前可邮件索要经盖章的PDF版邀请函。
支持现场刷卡或支付现金。
住宿 （不强行规定，可以自己预订住宿，费用自理。）
北京冠京饭店
地址：北京市丰台区丰台北路79号（近丰体南路），地铁9号线七里庄站A2口出
标准间： 300元/间/晚 （含早餐、含宽带）
备注：住宿统一安排，费用自理，办理住宿时告诉前台是参加此学习班的即可，住宿费办理住宿时交给酒店前台。住宿费发票将在退房时由酒店开具给您。
报名咨询
4000-709-739（何老师）（全国免长途费）
或 181-1725-1971（何老师）
其他说明
1、会议报到：4月21日下午15:00-21:00，在酒店大厅报到领取教材。提前到达酒店者，可先办理住宿，待15:00之后到酒店大厅报到领取教材。本地学员可第二天早上8:30开课前报道即可。会议下午5点结束。中午有午餐及休息时间一个半小时。会议含统一午餐。
2、会议无需电脑、鼠标。
3、会议期间领取发票。随发票一同发放的还有经过盖章的纸质版会议邀请函，以便于大家报销费用时作为会议凭证。如需要用来预支付费用，可以邮件索要经盖章的PDF版本的邀请函，您先将它打印出来拿去财务预支费用，均屡试不爽。
4、如果您针对基因编辑方面有何疑问，请带着问题来，并可与授课老师当场交流。
5、本次学习班不进行现场试验，因为那样过于浪费时间，我们会重点将个方面包括试验中遇到的问题一并讲解讨论。
报名方法
您报名后收到我方“报名后注意事项”邮件表明您报名成功，为了保证尽快收到回复邮件，请按下列格式撰写邮件并发送到指定报名邮箱：[email protected]
报名邮件内容模板：
我想报名参加4月份的CRISPR/Cas9基因编辑技术专题学习班，以下是我的信息：
1、姓名：
2、性别：
3、单位：
4、邮箱：
5、手机：
6、发票抬头：如不确定，先留空。
7、是否预订住宿：我们预订的住宿时间是从会议前一晚到会议最后一天中午退房。共两晚，如果有特殊需要请注明。
8、备注：备注说明写在此，如有多人参加，请将姓名、性别、邮箱、手机在上面分别单独列出，备注中写明一位主要联系人。
关于报名的说明：
1、报名截止时间：收到通知到每场会议开始的前一天均可报名。但尽早报名缴费能获得更好的座位。
2、请务必留意会议主办单位，是否为“莫速乎教育”；
3、务请发到指定报名邮箱，而不要直接回复收到的通知邮件；
4、您发送后24小时内会收到我们更详细的报到通知等说明，如2天后依然未收到请再次联系我们；
5、如有任何疑问，也可直接拨打会务组电话18117251971（何老师）或4000709739。
