综合评价疫苗价值：药品指南6大价值维度在疫苗中的应用

导 读： 免疫检查点抑制剂是癌症治疗领域的重大突破之一，其能够激活大量 T 细胞来发挥强大的抗肿瘤效应。以 PD-1/PD-L1 、 CTLA-4 为靶点的几种免疫检查点抑制剂目前被批准用于多种实体瘤治疗，为患者提供了显著的临床益处。然而，仍有患者对免疫检查点抑制剂反应不完全或没有反应，肿瘤组织中发生的新突变、新抗原，可能是导致其对治疗无效的关键原因。

基于个体化新抗原的疗法有望解决这一未被满足的临床需求。 mRNA-4157(V940) 是 Moderna 与 Merck 公司合作开发的一款个体化新抗原疗法（ Individualized Neoantigen Therapies, INT ），与 K 药联合使用时显示出临床益处，目前 mRNA-4157(V940) 针对于不同癌种的 2 期和 3 期临床试验正在进行中，有望成为首款获批的 mRNA 癌症疫苗。本期文章，菌菌将从 mRNA 个体性癌症疫苗的特征和新抗原获取方法等角度，解析 Moderna 关于 mRNA- 4157 的专利。

mRNA-4157/V940 是一种由 LNP 包封的 mRNA 癌症疫苗。其中 mRNA 序列编码多达 34 种个体化癌症新抗原，该抗原序列的获得是算法和癌症组织测序的结合。从患者身上采集肿瘤活检样本和正常血液样本（新抗原存在于个体的肿瘤组织中，但在正常非癌组织中不表达或以低水平表达），通过二代测序鉴别新抗原突变和主要组织相容性复合体（ MHC ），随后基于算法将最多 34 种新抗原用于 mRNA 疫苗的设计。

根据美国国家癌症研究所（ National Cancer Institute, NCI ）检测， mRNA-4157 包含了 41% 的 CD8+ 或 CD4+ 肿瘤浸润淋巴细胞（ TIL ）识别的新抗原。其中 61% （ 18/29 ）的患者接受的疫苗中至少包含了一个具 CD8+ 或 CD4+TIL 反应活性的新抗原； 28% （ 8/29 ）的患者在设计疫苗时包含了所有与已证实的 CD8+ 或 CD4+TIL 反应活性相关的新抗原。

图 1 mRNA-4157/V940 中新抗原的获取

在 I 期临床试验中， mRNA-4157 被证明具有良好的安全性和耐受性，同时观察到 mRNA-4157 与 PD-1/PDL1 抑制剂 K 药联合使用可诱导新抗原特异性 T 细胞的临床反应。 I 期试验纳入的患者人群包括黑色素瘤、非小细胞肺癌（ NSCLC ）、肾细胞癌、转移性皮肤鳞状细胞癌、膀胱癌等实体瘤患者。

在一项纳入黑色素瘤患者的 2b 期临床试验中， mRNA-4157 联合 K 药将患者的复发或死亡风险降低了 49% ，远处转移或死亡风险降低了 62% ， 2.5 年无复发生存率为 74.8% 。根据以上研究结果， mRNA-4157 联合 K 药用于完全切除后高危黑色素瘤患者的辅助治疗，被美国 FDA 授予突破性疗法认定，并被欧洲药品管理局授予优先药物计划。

目前 mRNA-4157 用于多个癌种的 2/3 期、全球多中心临床试验正在进行中，包括黑色素瘤（ NCT05933577 ）、非小细胞肺癌（ NCT06077760 ）、皮肤鳞癌（ NCT06295809 ）等。

图 2 Moderna mRNA-4157/V940 临床研究进展

Moderna 在专利 WO2020/097291 中描述了个性化肿瘤 mRNA 疫苗的设计和评估方法。 Moderna 开发的癌症疫苗组合物由编码 34 个肽表位的 mRNA 组成，其中 29 个是 MHC I 类表位， 5 个是 MHC II 类或 MHC I 类和 II 类表位。专利列举了两种示例：这些肽表位为个性化癌症抗原（ 3 至 20 个肽表位）或癌症热点抗原（ KRAS G12 突变或 KRAS G13 突变，或两者同时存在）。每个肽表位包含 8-31 个氨基酸，肽表位以串联抗原的形式出现，肽之间直接连接、或使用单个氨基酸接头、短肽接头连接。抗原的串联排列中需注意在肽边界产生的假表位。

肿瘤新抗原的选择主要利用下一代测序（ NGS ）技术，将患者肿瘤组织的转录组数据与外显子组序列信息进行比较，以识别患者特异性和肿瘤特异性突变。血液样本作为胚系（未突变）参考。血液样本的全外显子组测序（ WES ）结果用于确定受试者的人类白细胞抗原（ HLA ）类型。专利还介绍了识别表位的免费或商业化数据库（例如 Fonza Epibase 、对位），这类工具可用于预测靶抗原蛋白中最具免疫原性的表位。然后在人 HFA panel 中合成和筛选选定的肽，并使用最具免疫原性的序列来构建编码肽表位的核酸。整体而言，免疫原性是选择最优新表位的重要参考。

图 3 专利列举的肿瘤新突变

mRNA 修饰和制剂方面，该 mRNA 是一种化学修饰的 mRNA ，包封在脂质纳米颗粒（ LNP ）中。专利列举的 LNP 各脂质及参考的摩尔比范围为：约 20%~60% 的可电离氨基脂质、约 5%~25% 的磷脂 DSPC 、约 25%~55% 胆固醇、 0.5%~15% 的 PEG 修饰脂质（ PEG-DMG ）。

Moderna 在 mRNA 设计、递送和应用领域具有全面的专利布局，产品组合专注于 RNA 修饰和稳定，以及 mRNA 编码的免疫调节剂和抗原。在肿瘤免疫疗法方面， Moderna 目前保留了 2 个关键管线，一是本文介绍的个体化肿瘤疫苗 mRNA-4157/V940 ，最快已进展至临床 III 期；二是免疫检查点疫苗 mRNA -4359 ，处于 II 期临床阶段。其中， mRNA-4157 进展最快，有望成为第一款获批用于癌症患者的 mRNA 疫苗。