合理的样本采集是开始代谢组研究的第一步，也是决定研究结果是否真实、可靠的关键性因素。在上期公众号小编给大家介绍了代谢组取样准备、取样原则、根茎叶片不同样本的取样方法及样本量要求，详细见：
【干货分享】代谢组学样本收集指南（一）：根、茎、叶片
。本期小编继续给大家介绍花、果实、种子、愈伤组织、大型真菌的取样方法及样本量要求供科研工作者查阅。
A. 根据研究目的，选择5
～
10瓣花瓣或收集5
～
10朵花的花粉或3
～
6朵整花（根据花大小可调整取样数量）混合形成一个样品。
B. 把样本按照500mg～5g/sample装入离心管中，做好标记，迅速放入液氮中冷冻处理至少15min。
C. 取出后迅速放入自封袋中（每组一袋），在自封袋中放入标签纸注明样本信息。
D. 迅速放入-80℃冰箱冻存。足量干冰寄送。
A. 样本上的灰层等赃物要用PBS漂洗干净，并用吸水纸吸干样品表面。
B. 要根据实验设计，采集样本时保持样本一致性，尤其是同一组样本（颜色、衰老程度、光照、位置等）。
A. 选择来源3~6株不同植株相同位置的果实或种子作为一个生物学重复。
B. 根据具体实验设计取每组果实或种子的特定的部位或整个果实，将其均匀混合，如果是含多汁、块头较大的果实可使用手术刀将其切割为1~2cm均匀合适的小块。
C. 把样本按照500mg～5g/sample装入离心管中，并做好标记，迅速放入液氮中冷冻处理至少15min。取出后迅速放入自封袋中，在自封袋中放入标签纸注明样本信息。
D. -80℃冰箱冻存。足量干冰寄送。
A. 对多汁的果实进行取样很难保持均一性（如番茄、西瓜），强烈建议将整个果实进行切割、速冻、研磨、冻干，对粉末进行称重分装。
B. 对于果树类型的果实，若没有足够数量的的果树可以选择，可以选择同一果树上的不同果实样品进行混样形成一个生物学重复。
A. 选择相同培养条件下2～4个培养皿3～6不同区域的样品，混合成一个生物学重复。
B. 取出愈伤组织，切除样品中已经褐化或者分化成叶片、茎、根等组织的部分。
C. 取1g样品放置在适宜大小的离心管中（10mL），做好标记迅速放入液氮中冷冻处理至少15min。
D. -80℃冰箱冻存。足量干冰寄送。
已发生褐化或者分化成叶片、茎等组织的部分需切除干净。
A. 选择≥6个单菌体特定部位或整个菌株均匀混合为一个生物学重复样品。
B. 收集好真菌样品，用PBS水清洗除菌体上的土壤、培养基等杂质，并用吸水纸吸干样品表面。沿垂直轴的中心线将菌体切割成1～2cm大小的块状，整个操作在冰上进行。
C. 取1g放置在适宜大小的离心管中（10mL/15mL），并做好标记，迅速放入液氮中冷冻处理至少15min。
D. -80℃冰箱冻存。足量干冰寄送。
A. 真菌上土壤、培养基等杂质务必清除干净。
B. 取样部位需根据自己研究目的进行选择。
1.如果样本量太少，部分代谢物可能无法检出。
2.如果生物学重复太少，后期构建模型较差，满足条件的差异代谢物数量会很少，甚至没法进行统计学分析。
3.如果干冰太少，样本存在冻融风险，代谢物可能发生降解，干冰用量是以3-4公斤干冰挥发一天计算。
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