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EZ-HRex™新技术,点突变/敲入极速6周

iNature  · 公众号  ·  · 2024-11-12 09:28

正文

在构建点突变或敲入细胞的过程中,主要难点是模型所需的HDR修复效率太低,大部分基因型是由NHEJ修复方式造成的indel。其中一个主要原因是HDR修复的细胞周期依赖性:NHEJ几乎在任何细胞周期阶段都能发生,而 HDR通常只有在S期和G2期——即DNA复制的阶段,才会进行。 这就使得HDR的机会窗口比NHEJ小得多,限制了其效率。

NEWS

EZ-HRex™全新升级

源井生物经过数年研发,在原CRISPR-U™基因编辑技术的基础上, 创新性地添加U + 分子,将该技术升级为EZ-HRex™

· 有效调节细胞周期,促进转染后更多细胞进入S/G2期

· 降低NHEJ途径活性,减少indel基因型占比,提高HDR效率

技术升级后,细胞基因突变和片段敲入的HDR效率得到全面提升,转染后Cell Pool水平的 HDR基因型占比高达84%


EZ-HRex™技术HDR效率展示

使用EZ-HRex™技术构建FOXP1基因点突变HEK293细胞,电转48h后收集Cell Pool,提取基因组DNA,经扩增后测序。通过EZ-editor™基因型分析系统对测序结果进行分析,结果显示该点突变Cell Pool的HDR效率是84%。



联系电话: 18054268871 ,微信同号



客户成功案例分析




IF=20.8

肺癌 ——A549细胞MYC基因


DOl:https://doi.org/10.1038/542255-024-01037-4


该研究采用源井生物构建MYC (p.K148R)点突变A549细胞,MYC (p.K148Q)点突变的A549细胞,模拟乙酰化和非乙酰化的c-Myc状态,并研究这些改变对肿瘤细胞行为的影响。




IF=5

人乳头瘤甲状腺癌 ——TPC-1细胞TERT基因


DOI:https://doi.org/10.1210/clinem/dgae327


该研究采用了源井构建的点突变细胞,将TPC-1细胞中的TERT C228T突变转换回野生型。


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